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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母表达，用BglⅡ线性化9k时目的基因是如何整合到基因组上的
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爱上文慧

银虫 (小有名气)

[求助] 酵母表达，用BglⅡ线性化9k时目的基因是如何整合到基因组上的

我看到表达手册上说BglⅡ是唯一的酶切位点，但是9k图谱上又显示有两个该位点，纠结。。。
还有就是一直不明白目的基因是怎么整合到酵母基因组的，请教各位高手了，谢谢！
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1楼 2013-03-29 22:05:41
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
爱上文慧: 金币+1, 因为我的基因太长了，只有这一个酶切位点可以用 2013-03-31 09:49:08
myprayer: 金币+1, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-01 22:44:25
不知你为什么选取这个酶呢?

我用的是其它的内切酶呢.
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2楼2013-03-30 19:04:11
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
爱上文慧: 金币+1, 亲，这个能用来直接转酵母吗？ 2013-03-31 22:07:54
NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒


你可以用一下.

不涉及酶切位点.

轻松构建载体
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3楼2013-03-31 12:12:30
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你要先搞懂原理.

载体构建好后,

我用的就是NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒.
自己做的感受态细胞,进行电转化的.
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4楼2013-04-01 16:58:02
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爱上文慧

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-04-01 16:58:02
你要先搞懂原理.

载体构建好后,

我用的就是NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒.
自己做的感受态细胞,进行电转化的.

不是吧，转化酵母之前不是要线性化吗？载体我已经构建好了，我的线性化位点只能选BglⅡ，我的问题是，用这个位点线性化之后目的片段是怎么整合到酵母基因组上的。。。
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每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
5楼2013-04-02 10:17:11
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爱上文慧

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-04-01 16:58:02
你要先搞懂原理.

载体构建好后,

我用的就是NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒.
自己做的感受态细胞,进行电转化的.

不是吧，转化酵母之前不是要线性化吗？载体我已经构建好了，我的线性化位点只能选BglⅡ，我的问题是，用这个位点线性化之后目的片段是怎么整合到酵母基因组上的。。。
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每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
6楼2013-04-02 10:17:40
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不知你为什么选取这个酶呢?

我用的是其它的内切酶呢.
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7楼2013-04-02 10:42:46
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