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爱上文慧

银虫 (小有名气)

[求助] 酵母表达,用BglⅡ线性化9k时目的基因是如何整合到基因组上的

我看到表达手册上说BglⅡ是唯一的酶切位点,但是9k图谱上又显示有两个该位点,纠结。。。
还有就是一直不明白目的基因是怎么整合到酵母基因组的,请教各位高手了,谢谢!
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每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
爱上文慧: 金币+1, 因为我的基因太长了,只有这一个酶切位点可以用 2013-03-31 09:49:08
myprayer: 金币+1, 鼓励应助,分子生物版块,期待你的精彩。 2013-04-01 22:44:25
不知你为什么选取这个酶呢?

我用的是其它的内切酶呢.
2楼2013-03-30 19:04:11
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
爱上文慧: 金币+1, 亲,这个能用来直接转酵母吗? 2013-03-31 22:07:54
NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒


你可以用一下.

不涉及酶切位点.

轻松构建载体
3楼2013-03-31 12:12:30
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你要先搞懂原理.

载体构建好后,

我用的就是NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒.
自己做的感受态细胞,进行电转化的.
4楼2013-04-01 16:58:02
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爱上文慧

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-04-01 16:58:02
你要先搞懂原理.

载体构建好后,

我用的就是NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒.
自己做的感受态细胞,进行电转化的.

不是吧,转化酵母之前不是要线性化吗?载体我已经构建好了,我的线性化位点只能选BglⅡ,我的问题是,用这个位点线性化之后目的片段是怎么整合到酵母基因组上的。。。
每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
5楼2013-04-02 10:17:11
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爱上文慧

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-04-01 16:58:02
你要先搞懂原理.

载体构建好后,

我用的就是NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒.
自己做的感受态细胞,进行电转化的.

不是吧,转化酵母之前不是要线性化吗?载体我已经构建好了,我的线性化位点只能选BglⅡ,我的问题是,用这个位点线性化之后目的片段是怎么整合到酵母基因组上的。。。
每一个你讨厌的现在都有一个不努力的曾经
6楼2013-04-02 10:17:40
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不知你为什么选取这个酶呢?

我用的是其它的内切酶呢.
7楼2013-04-02 10:42:46
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