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liujinlj0305

木虫 (小有名气)

[求助] ABTS法测漆酶活性

最近要用ABTS法测漆酶的活性,用实验室原有的试剂感觉吸光度变化很小,怀疑可能是ABTS存放的时间太久了,所以想重新配下溶液,我想知道0.5mmol/L ABTS的配制方法 ,另外配好的ABTS(2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐) 可以存放多长时间?有哪位大咖知道的话请尽量说详细点。。
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shiji360

新虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
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3楼2013-03-28 16:13:21
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sunjiankc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
ABTS需要避光低温保存,如果保存不当,那么溶液应该颜色已经很蓝了,自然不能用。一般来说吸光值在A405或者A410已经高于0.5建议就不要用了,严格来说应该控制在0.1以下才行的。
    至于存放多长时间,参考上文。
    ABTS是人工合成的漆酶专用底物,如果你测酶活变化小,说明活性低。但是做酶学研究的,要认真考虑每一个因素,比如你的反应温度是不是太低?比如缓冲液的pH值?大部分漆酶是酸性的,尤其是ABTS作为底物时,只有极少数碱性漆酶,你可以用pH3和pH8的缓冲液试试。
    祝实验顺利。
4楼2013-03-28 16:29:33
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1522814041

新虫 (初入文坛)

你好,你的问题解决了吗?我也有同样的问题,希望能得到你的帮助
5楼2016-01-12 22:08:46
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孙涛1号

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1522814041 at 2016-01-12 22:08:46
你好,你的问题解决了吗?我也有同样的问题,希望能得到你的帮助

你好,请问你的问题解决了吗?本人最近也在做ABTS的显色问题,总是看不到。我配置的ABTS颜色本来就是深绿色,缓冲液PH6,底色是绿的,反应后也是绿的,根本看不到。有时候还变成无色。可以的话交流一下。谢谢!
6楼2016-03-23 20:23:24
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