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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » ABTS法测漆酶活性
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liujinlj0305

木虫 (小有名气)

[求助] ABTS法测漆酶活性

最近要用ＡＢＴＳ法测漆酶的活性，用实验室原有的试剂感觉吸光度变化很小，怀疑可能是ＡＢＴＳ存放的时间太久了，所以想重新配下溶液，我想知道０.５ｍｍｏｌ／Ｌ　ＡＢＴＳ的配制方法　，另外配好的ABTS（2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐）　可以存放多长时间？有哪位大咖知道的话请尽量说详细点。。
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1楼 2013-03-28 15:28:58
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孙涛1号

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1522814041 at 2016-01-12 22:08:46
你好，你的问题解决了吗？我也有同样的问题，希望能得到你的帮助

你好，请问你的问题解决了吗？本人最近也在做ABTS的显色问题，总是看不到。我配置的ABTS颜色本来就是深绿色，缓冲液PH6，底色是绿的，反应后也是绿的，根本看不到。有时候还变成无色。可以的话交流一下。谢谢！
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6楼2016-03-23 20:23:24
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shiji360

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
3楼2013-03-28 16:13:21
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sunjiankc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
ABTS需要避光低温保存，如果保存不当，那么溶液应该颜色已经很蓝了，自然不能用。一般来说吸光值在A405或者A410已经高于0.5建议就不要用了，严格来说应该控制在0.1以下才行的。
    至于存放多长时间，参考上文。
    ABTS是人工合成的漆酶专用底物，如果你测酶活变化小，说明活性低。但是做酶学研究的，要认真考虑每一个因素，比如你的反应温度是不是太低？比如缓冲液的pH值？大部分漆酶是酸性的，尤其是ABTS作为底物时，只有极少数碱性漆酶，你可以用pH3和pH8的缓冲液试试。
    祝实验顺利。
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4楼2013-03-28 16:29:33
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1522814041

新虫 (初入文坛)
你好，你的问题解决了吗？我也有同样的问题，希望能得到你的帮助
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5楼2016-01-12 22:08:46
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