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liujinlj0305

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[求助] ABTS法测漆酶活性

最近要用ＡＢＴＳ法测漆酶的活性，用实验室原有的试剂感觉吸光度变化很小，怀疑可能是ＡＢＴＳ存放的时间太久了，所以想重新配下溶液，我想知道０.５ｍｍｏｌ／Ｌ　ＡＢＴＳ的配制方法　，另外配好的ABTS（2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐）　可以存放多长时间？有哪位大咖知道的话请尽量说详细点。。

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1楼 2013-03-28 15:28:58

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liujinlj0305

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自己先顶下~~

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2楼2013-03-28 15:29:24

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shiji360

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3楼2013-03-28 16:13:21

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sunjiankc

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【答案】应助回帖

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ABTS需要避光低温保存，如果保存不当，那么溶液应该颜色已经很蓝了，自然不能用。一般来说吸光值在A405或者A410已经高于0.5建议就不要用了，严格来说应该控制在0.1以下才行的。
至于存放多长时间，参考上文。
ABTS是人工合成的漆酶专用底物，如果你测酶活变化小，说明活性低。但是做酶学研究的，要认真考虑每一个因素，比如你的反应温度是不是太低？比如缓冲液的pH值？大部分漆酶是酸性的，尤其是ABTS作为底物时，只有极少数碱性漆酶，你可以用pH3和pH8的缓冲液试试。
祝实验顺利。