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[求助]
HPLC不出峰~求助~~
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各位大神~本人初识HPLC就碰到棘手的问题了…… 事情是这样的…… 本人有一个样品，其中目标物含量比较低，黄酮类，标准品在260nm，ODS色谱柱，甲醇-水（65:35），44分钟出峰，但是样品在44分钟左右没有峰。样品中加入标准品在相同条件下出峰。于是考虑是大极性的杂质峰过高把目标峰压下去了，于是用聚酰胺除杂，但是还是没有峰，ODS除杂，依旧没有峰…… 请问，怎么能分出我要的峰呢~~不胜感谢！！！ |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
gail3123: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢，我试一下~~ 2013-03-23 11:07:40
感谢参与，应助指数 +1
gail3123: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢，我试一下~~ 2013-03-23 11:07:40
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是不是你的待测成分的含量太低了，以至于测不到峰，是否将样品浓缩或加大进样量试试。再者黄酮采用聚酰胺除杂，是不是吸附强，目标成分未洗脱下来，未达到富集作用，反而造成损失？ “大极性的杂质峰过高把目标峰压下去了”，是指你的待测峰旁有个大的杂质峰？但你的“样品中加入标准品在相同条件下出峰”似乎杂质峰并不影响目标峰的检出。所以请你考虑一下样品中目标成分的含量大小问题以及你自己的样品取样量是否能达到目标成分的检出。前处理时是否采用的除杂手段不合适造成目标成分的损失。 |
3楼2013-03-23 00:02:14