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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为什么我算出来的酶活那么小呢，都不到1呢
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非常龙齐齐

银虫 (小有名气)
wizardfan: 那就请贴出 标准曲线 啥的以方便别人帮助你 2013-03-21 08:10:03
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10楼: Originally posted by 幽幽深谷竹 at 2013-03-20 11:44:16
比色法应该有吸光度的，你的公式没反映出来呢...

公式中的浓度c就是根据标准曲线用吸光度算出来的啊
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11楼2013-03-20 17:04:26
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非常龙齐齐

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 非常龙齐齐 at 2013-03-20 17:04:26
公式中的浓度c就是根据标准曲线用吸光度算出来的啊...

我标准曲线如下：

)([JGRG3V1`3`~P5@T]]ID4.jpg
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12楼2013-03-22 15:00:37
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非常龙齐齐

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 幽幽深谷竹 at 2013-03-20 09:41:30
我做过淀粉酶、蛋白酶酶活测定，都还不错。我用的是试剂盒，最重要的一点就是要确定最适底物浓度，不知道楼主是否做过预实验来确定一下。
还有，从你的公式来看，我怎么觉得那么别扭呢？请问你用的是比色法吗？或者 ...

我可不可以把公式中酶的用量单位定义成g而不是mg呢？
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13楼2013-04-01 15:57:35
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

★ ★
非常龙齐齐: 金币+2 2013-04-02 16:52:10
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13楼: Originally posted by 非常龙齐齐 at 2013-04-01 15:57:35
我可不可以把公式中酶的用量单位定义成g而不是mg呢？...

要看你测的是什么，脂肪酶的活力一般都不高。比如植食性昆虫，这个酶肯定不会高，都是1以下。酶活力单位可以自己定义的，换成G也可以的。
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非常龙齐齐
我就是我IamwhatIam
14楼2013-04-02 10:27:05
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非常龙齐齐

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by 幽幽深谷竹 at 2013-04-02 10:27:05
要看你测的是什么，脂肪酶的活力一般都不高。比如植食性昆虫，这个酶肯定不会高，都是1以下。酶活力单位可以自己定义的，换成G也可以的。...

好的，谢谢
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15楼2013-04-02 16:52:00
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2011jonathan

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
16楼2013-12-07 11:26:16
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

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16楼: Originally posted by 2011jonathan at 2013-12-07 11:26:16
您好，打扰您了，我最近在测微生物发酵液上清脂肪酶的酶活，用pNPP分光光度法测脂肪酶酶活，以及制作pNP标准曲线，发现测出的OD值普遍偏低，普遍集中在0.1~0.2，换算成pNP浓度(uM)后数值基本在10以内，根据其他文献 ...

知道了吸光度以后，根据做出的标准曲线，可以找出反应前后的产物浓度，接着就能算出酶活了。
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我就是我IamwhatIam
17楼2013-12-08 17:47:22
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2011jonathan

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
18楼2013-12-10 19:51:16
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

引用回帖:
18楼: Originally posted by 2011jonathan at 2013-12-10 19:51:16
您好，我根据标曲算出反应后产物pNP的浓度后该用什么公式算酶活呢，我看了好多篇文献好像求酶活的公式都不太一样，有的公式还带有摩尔消光系数，有的公式还用不着产物浓度，我也搞不清用哪个，能麻烦您再告诉我求酶 ...

这个公式确实是不同，但是原理都一样，看你怎么定义一个酶活力单位了。如果你的定义是单位时间单位体积产生的产物量，那就根据这个定义去算啊，生物化学里有的，你可以参照酶活拿一章节。
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我就是我IamwhatIam
19楼2013-12-10 21:21:24
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yunlinglingy

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 非常龙齐齐 at 2013-03-22 15:00:37
我标准曲线如下：

)(]ID4.jpg
...

你好，我想问下你的对硝基苯酚标准曲线是如何绘制的？谢谢
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20楼2014-09-02 16:24:01
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