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非常龙齐齐

银虫 (小有名气)

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[求助] 为什么我算出来的酶活那么小呢，都不到1呢已有2人参与

在一定条件下，每分钟释放出1μmol对硝基苯酚所消耗的酶量定义为1个脂肪酶活力单位(U)。
按下式计算酶活:
X=cV/（tm）
式中:
X为脂肪酶活力，U•mg-1；c为对硝基苯酚浓度，μmol•mL-1；V为酸碱调节后的反应液终体积，mL；m为酶的质量，mg；t为作用时间，min。
我根据上面公式计算出来的脂肪酶活力很小，10的-4次方左右的，有哪位知道是哪里出了问题呢？我用的是PNPP法测酶活性，对硝基苯酚浓度C根据标准曲线算出来的，底物与酶液反应后，用碳酸钠溶液萃取，最后体积是10ml，反应时间10min，酶的用量是100微升*15mg/ml=1.5mg

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1楼 2013-03-19 11:06:58

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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

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【答案】应助回帖

引用回帖:

16楼: Originally posted by 2011jonathan at 2013-12-07 11:26:16
您好，打扰您了，我最近在测微生物发酵液上清脂肪酶的酶活，用pNPP分光光度法测脂肪酶酶活，以及制作pNP标准曲线，发现测出的OD值普遍偏低，普遍集中在0.1~0.2，换算成pNP浓度(uM)后数值基本在10以内，根据其他文献 ...

知道了吸光度以后，根据做出的标准曲线，可以找出反应前后的产物浓度，接着就能算出酶活了。