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非常龙齐齐

银虫 (小有名气)

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性别: MM
专业: 用于检测、分析、成像及治

[求助] 为什么我算出来的酶活那么小呢，都不到1呢已有2人参与

在一定条件下，每分钟释放出1μmol对硝基苯酚所消耗的酶量定义为1个脂肪酶活力单位(U)。
按下式计算酶活:
X=cV/（tm）
式中:
X为脂肪酶活力，U•mg-1；c为对硝基苯酚浓度，μmol•mL-1；V为酸碱调节后的反应液终体积，mL；m为酶的质量，mg；t为作用时间，min。
我根据上面公式计算出来的脂肪酶活力很小，10的-4次方左右的，有哪位知道是哪里出了问题呢？我用的是PNPP法测酶活性，对硝基苯酚浓度C根据标准曲线算出来的，底物与酶液反应后，用碳酸钠溶液萃取，最后体积是10ml，反应时间10min，酶的用量是100微升*15mg/ml=1.5mg

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1楼 2013-03-19 11:06:58

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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

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专业: 生理生态学

【答案】应助回帖

引用回帖:

18楼: Originally posted by 2011jonathan at 2013-12-10 19:51:16
您好，我根据标曲算出反应后产物pNP的浓度后该用什么公式算酶活呢，我看了好多篇文献好像求酶活的公式都不太一样，有的公式还带有摩尔消光系数，有的公式还用不着产物浓度，我也搞不清用哪个，能麻烦您再告诉我求酶 ...

这个公式确实是不同，但是原理都一样，看你怎么定义一个酶活力单位了。如果你的定义是单位时间单位体积产生的产物量，那就根据这个定义去算啊，生物化学里有的，你可以参照酶活拿一章节。