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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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PvPAP

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] western blot 信号衰减的好快,求哪位有经验的分析下原因。。。。。。。

在暗房压片2min,再压一张5min的,后者的信号都不如前者的。靠两边的条带信号衰减的最明显,最边上的带还检测不出来。求破。。。。。
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cicelyzh

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-17 20:09:45
PvPAP: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-03-17 22:29:08
用的是辣根过氧化物酶做底物的ECL吧。有一定衰减是正常的,因为产物本身不稳定性。不过,象你说的这么快,多半是试剂有些过期了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-03-17 11:10:08
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gyesang

新虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-17 20:09:51
PvPAP: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-03-17 22:29:13
也有一个原因就是,你的样品上样量太大,然后一抗二抗结合太强,这样加的DAB底物一下子就被分解了,所以信号就衰减了,如果衰减很快的话,大部分是这个原因

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-03-17 19:23:08
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PvPAP

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-17 11:10:08
用的是辣根过氧化物酶做底物的ECL吧。有一定衰减是正常的,因为产物本身不稳定性。不过,象你说的这么快,多半是试剂有些过期了。

是的。试剂可能是出了点问题,今天实验室有同学试着换一些新的,好像效果不错。谢谢回帖
4楼2013-03-17 22:22:29
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PvPAP

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-03-17 19:23:08
也有一个原因就是,你的样品上样量太大,然后一抗二抗结合太强,这样加的DAB底物一下子就被分解了,所以信号就衰减了,如果衰减很快的话,大部分是这个原因

有可能。不过这个上样量之前也有试过,信号没有衰减的这么严重。其实我的蛋白量不大,不过由于样品要进行一些处理,导致上样体积太大,对于条带的形状倒是有些影响,正考虑减小一下反应体系。谢谢指教~
5楼2013-03-17 22:28:24
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