24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1460  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

伤何处

木虫 (正式写手)


[交流] [求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题

最近在构建植物RNAi载体,通过BP反应将基因转入了pHGRV载体里面,然后得到很多克隆。但不知道怎么测序确定序列,因为重组入载体里的基因是反向重复的两个,中间是内含子。想问下大家都是怎么确定的?  也可以通过测序,但加起来估计有3Kb,,,S所以想问下大家是否有其他更好的方法。欢迎交流~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by potata at 2013-08-13 11:20:33
前面实验非常肯定的话做个酶切检测一下就可以,不放心就做单引物测序,我就是这么做的。顺便想问下,有pHGRV载体图谱吗?方便的话给传一个看看。

嗯嗯,我就是单引物测序确定的。我把序列跟图谱都发给你把~图谱是我自己弄得,不是很好看哈
[求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题
pHGRV Map.png

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : pHGRV.gb
  • 2013-08-13 11:53:23, 172.52 K
8楼2013-08-13 11:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
伤何处: 金币+2 2013-03-17 22:58:15
若不需要完全知道LR反应后得到表达载体上的序列,只是检测插入片段是否连上,可以测一下,测出有回文结构即可,或单引物PCR检测
3楼2013-03-17 22:50:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 香菱儿 at 2013-03-17 22:50:29
若不需要完全知道LR反应后得到表达载体上的序列,只是检测插入片段是否连上,可以测一下,测出有回文结构即可,或单引物PCR检测

你好~但我想确定序列,避免发生点突导致个别位点序列不一样。。这怎么办?
4楼2013-03-17 22:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxwjimmy

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
伤何处: 金币+2 2013-03-19 08:26:40
那就亚克隆测序吧
5楼2013-03-19 00:28:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600,专业课化工原理,320分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-29 4/200 2026-03-29 23:12 by Evan_Liu
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 0856求调剂 +13 zhn03 2026-03-25 14/700 2026-03-29 08:13 by fmesaito
[考研] 311(085601)求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕,293,求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
信息提示
请填处理意见