应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » [求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题
51/1返回列表
查看: 1442  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

伤何处

木虫 (正式写手)

[交流] [求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题

最近在构建植物RNAi载体，通过BP反应将基因转入了pHGRV载体里面，然后得到很多克隆。但不知道怎么测序确定序列，因为重组入载体里的基因是反向重复的两个，中间是内含子。想问下大家都是怎么确定的?  也可以通过测序，但加起来估计有3Kb,,,S所以想问下大家是否有其他更好的方法。欢迎交流~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-16 22:06:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by potata at 2013-08-13 11:20:33
前面实验非常肯定的话做个酶切检测一下就可以，不放心就做单引物测序，我就是这么做的。顺便想问下，有pHGRV载体图谱吗？方便的话给传一个看看。

嗯嗯，我就是单引物测序确定的。我把序列跟图谱都发给你把~图谱是我自己弄得，不是很好看哈
[求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题
pHGRV Map.png
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : pHGRV.gb
    • 2013-08-13 11:53:23, 172.52 K
8楼2013-08-13 11:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
伤何处: 金币+2 2013-03-17 22:58:15
若不需要完全知道LR反应后得到表达载体上的序列，只是检测插入片段是否连上，可以测一下，测出有回文结构即可，或单引物PCR检测
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-03-17 22:50:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 香菱儿 at 2013-03-17 22:50:29
若不需要完全知道LR反应后得到表达载体上的序列，只是检测插入片段是否连上，可以测一下，测出有回文结构即可，或单引物PCR检测

你好~但我想确定序列，避免发生点突导致个别位点序列不一样。。这怎么办？
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-17 22:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxwjimmy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
伤何处: 金币+2 2013-03-19 08:26:40
那就亚克隆测序吧
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-03-19 00:28:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 5/250 2026-03-02 06:41 by 汪！？！
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭