应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » [求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题
51/1返回列表
查看: 1437  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

伤何处

木虫 (正式写手)

[交流] [求教]关于RNAi载体的最终确定序列问题

最近在构建植物RNAi载体，通过BP反应将基因转入了pHGRV载体里面，然后得到很多克隆。但不知道怎么测序确定序列，因为重组入载体里的基因是反向重复的两个，中间是内含子。想问下大家都是怎么确定的?  也可以通过测序，但加起来估计有3Kb,,,S所以想问下大家是否有其他更好的方法。欢迎交流~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-03-16 22:06:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yxwjimmy at 2013-03-19 00:28:39
那就亚克隆测序吧

你好，谢谢~ 就是另外在载体上设计引物，分别测这两个片段么？
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-19 08:27:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
伤何处: 金币+2 2013-03-17 22:58:15
若不需要完全知道LR反应后得到表达载体上的序列，只是检测插入片段是否连上，可以测一下，测出有回文结构即可，或单引物PCR检测
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-03-17 22:50:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

伤何处

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 香菱儿 at 2013-03-17 22:50:29
若不需要完全知道LR反应后得到表达载体上的序列，只是检测插入片段是否连上，可以测一下，测出有回文结构即可，或单引物PCR检测

你好~但我想确定序列，避免发生点突导致个别位点序列不一样。。这怎么办？
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-17 22:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxwjimmy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
伤何处: 金币+2 2013-03-19 08:26:40
那就亚克隆测序吧
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-03-19 00:28:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭