24小时热门版块排行榜    

查看: 4041  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] miRNA反转录总是效果很差

miRNA反转录总是效果很差,加尾法试过10条miRNA只有1个引物凑合能用,茎环法14条miRNA只有3条引物能用,试验做不下去了,谁能有效的帮我设计一下引物啊?我的试验材料是小麦。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 这是马甲 at 2013-09-17 09:17:36
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错

试验已经顺利完成了
3楼2013-09-17 20:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

这是马甲

至尊木虫 (著名写手)

谁的马甲都不是

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-17 16:38:29
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错
这是一只什么都不懂的马甲~~~
2楼2013-09-17 09:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Myre-Y0Y0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by machao8405 at 2013-09-17 20:53:45
试验已经顺利完成了...

卤煮咋做的、我用的茎环引物反转录,可是我的目的条带相当不亮啊、microRNA的反转录和其他的反转录有什么区别么?
4楼2013-09-18 08:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Myre-Y0Y0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 这是马甲 at 2013-09-17 09:17:36
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错

我的也是动物的、我用的也是茎环引物、可是我的目的条带正常PCR出来就条带很弱、我想知道我的问题出在哪里了、小RNA的反转录和正常的RNA有什么不同么?我的内参却很亮,溶解曲线也很正常。。我快崩溃了。。。
5楼2013-09-18 08:37:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 15:33 by KM5EcsNQRBPn
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 15:30 by KM5EcsNQRBPn
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:45 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见