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海之子211新虫 (小有名气)
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[求助]
SDS 提取液如何配置
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SDS提取液(包括100mmol/L Tris-HCl(pH8.0)，50mmol/L EDTA，250mmol/L NaCl) 是不是按照1L溶液 算Tris-HCl EDTA，NaCl 分子量 需要往溶液添加多少量就行，最后调pH |
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【答案】应助回帖
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海之子211: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-14 15:57:41
海之子211: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-14 15:57:41
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分别调。 参考一下体系： 试验目的 1 明确提取液的配制原理 2 通过对提取液的配制，掌握提取液中各试剂在提取中的作用。 实验原理 DNA 是遗传物质, 植物DNA 的提取是植物基因工程的基础。通常要求所提取的DNA 要有理想的纯度,足够完整,无断裂降解,提取过程尽量少使用有毒化学品等。为了达到上述要求,已报道了不少提取植物DNA 的方法,归纳起来,主要有CTAB 法、SDS法和碱提取法。DNA分子是分子生物学研究的基本材料, 依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的DNA。因此提取液里试剂的配比也有所不同：植物DNA的抽提常采用CTAB方法： 配方如下： 1 配制提取液之前，先配制母液。 母液（灭菌）：5M NaCl ( 58.4g加ddH2O制成200ml溶液) 0.5M Na2-EDTA(37.22g+ddH2O至200ml,用NaOH调pH值为8.0) 1M Tris-HCl(12.11gTris-HCl+ ddH2O至100ml,用浓盐酸调pH值至8.0) 2 提取液配方 100ml 加入：CTAB粉剂 2g 1M Tris(pH8.0) 10ml 0.5M EDTA(pH8.0) 4ml 5M NaCl 28ml PVP 1g β-巯基乙醇 1ml 加双蒸水定容至100ml 3 抽提液 分别量取苯酚、氯仿、异戊醇按25：24：1的体积比混合，再分别量取氯仿、异戊醇按24：1的体积比混合，配制成两种抽提液，各配制100ml 4 0.1xTE 1mlTris，20μl EDTA中加H2O, 用HCl调pH至8.0, 定溶，灭菌 |
4楼2013-03-14 13:10:04
2楼2013-03-14 12:22:12
海之子211
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3楼2013-03-14 13:04:15
海之子211
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5楼2013-03-14 14:47:19
