应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pET-30a(+)不表达
52/1返回列表
查看: 3308  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

田甜思

新虫 (初入文坛)

[求助] pET-30a(+)不表达

一直在做pET-30a(+)这个载体，但是不表达，我是在37度下培养的，都是在OD600=0.6-0.7之间加IPTG的，但就是不表达，质粒测序是正确的。各位帮忙解决下。谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-03-12 20:40:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qqxs

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.是否有包涵体-如果有，降低IPTG含量，降低诱导温度
2.密码子是否优化（有否稀有密码子）-如果有，换菌株，如rosetta
3.有没有移码？
4.如果是表达量少，OD600到1再加IPTG，诱导时间和温度也要优化
赞一下 回复此楼
16楼2013-03-19 11:16:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你检测的是全菌蛋白吗？有跑胶的图片吗？
赞一下 回复此楼
2楼2013-03-13 00:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian520yi

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白不表达和蛋白本身的性质，蛋白来源物种有很多关系。
不表达是很正常的。
赞一下 回复此楼
成功源自于不断的努力和坚持
3楼2013-03-13 08:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxl.1989822

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
诱导时采用几个IPTG浓度梯度，不同浓度的IPTG下对表达量有重要影响。
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-13 10:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭