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1989zb

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[求助] pcr目的条带暗，怎么办呢？？

最近一直pcr,可是目的条带总是很暗，该怎么优化条件呢？而且在胶回收后用同样的条件跑，连条带都没有，目的片段大小1500bp
反应条件：94度 4min 94度 30s 52度30s 72 度 90s 72度10min
该怎么优化呢？？

未命名.jpg

胶回收稀释后pcr.jpg

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1楼 2013-03-11 09:33:59

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引用回帖:

12楼: Originally posted by tongyanna at 2013-03-11 19:24:17
目的条带也不是很弱，提高退火温度2-3度若还是这样那就和温度没多大关系了，你的PCR体系可能需要优化，现在那种混合好的pcr体系有的就比较好用，你可以试试。再就是胶带回收时少加些水或TE。

混合好的pcr体系？？什么意思!()(忘了说电泳是点的20ul)