10楼: Originally posted by zhoulubin at 2013-03-11 18:51:43
回收后电泳不知道你上样量是多少，换句话说，回收后的浓度时多少。如果很低的话，干嘛要稀释那么多倍。我一般回收产物都不稀释的，直接p...

12楼: Originally posted by tongyanna at 2013-03-11 19:24:17
目的条带也不是很弱，提高退火温度2-3度若还是这样那就和温度没多大关系了，你的PCR体系可能需要优化，现在那种混合好的pcr体系有的就比较好用，你可以试试。再就是胶带回收时少加些水或TE。

18楼: Originally posted by li315yanwei at 2013-04-09 10:02:52
杂带比较多，并且要比目的条带亮很多，建议提高退火温度或者减少dNTP的含量，如果只是想要回收片段的话，电泳点样量加大。

15楼: Originally posted by 137167741 at 2013-03-12 17:07:26
第一、升高退货温度，应该可以做一个温度梯度，从而选择最适温度。可以选择55~65度
第二、减少引物量以及模板量
第三、适当加大1~2个循环数
第四、电泳检测的时候，不需要点20ul
第五、重新设计引物
祝你实验顺 ...