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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr目的条带暗，怎么办呢？？
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1989zb

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by yilunanxia at 2013-03-11 23:34:42
试试提高退火温度吧，可以减少有效的减少非特异性扩增，实在不行，重新设计引物再来吧。没办法。

谢谢
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21楼2013-04-09 19:34:47
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1989zb

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by woke2008 at 2013-03-12 17:23:04
把退货温度提高到58度~~引物少加点，不是越多越好~

谢谢
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22楼2013-04-09 19:34:58
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1989zb

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by tongyanna at 2013-03-12 19:06:25
我们做实验时有时候自己配制pcr体系就是自己加酶、dntp、模板、水。而有种PCR产品是公司买的那种，酶和DNTP已经配置好了，用的时候只加模板就行。很多公司有卖的

谢谢
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23楼2013-04-09 19:35:09
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zx1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1989zb at 2013-03-11 11:01:11
第二张图片就是胶回收在p  的 结果什么都没p 出来  不管是用胶回收原液或者稀释的都没p出来 郁闷的很
浓度不够没办法测序这才真郁闷了。...

胶回收完了有没有测一下浓度呢？如果高于20ng/ul，再P的话应该会有条带的
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24楼2013-07-23 14:41:45
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勇敢小飞侠

新虫 (小有名气)
减少琼脂糖凝胶的浓度
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25楼2013-07-23 17:23:26
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考拉003

新虫 (小有名气)
把体系设置好做一个降落PCR，56-54-52 ，前面两个温度各15个循环，52度5个循环试试。
胶回收要提高回收量，需要P100ul回收试试。回收过程中，最好精确称量胶重，加3.2倍回收液，溶解完全后室温上柱子，5分钟10000转离心1分钟，液体回收在过一次，最后洗脱时可以加水37度温浴5分钟后离心，同样过俩次柱子。
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不是微生物专业的却进入微生物行业
26楼2014-07-05 04:51:10
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