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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

[求助] EST序列是什么啊?具体作用是什么啊?

多谢各位帮忙了!
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如果不努力,肯定没收获!
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axian

木虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-03-26 04:13:14
引用回帖:
6楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2013-03-11 16:35:26
谢谢!有点明白了,但是还是有两个地方不太理解:
1 “将cDNA随机打断成小片段,测序后得到小片段的长度为400bp”,随机打成的小片段有多少啊?只有一个吗?还是从多个小片段里随机选取一个?
2  “这段400bp的小 ...

1:
理论上讲,x基因表达的mRNA反转录成的cDNA 被打成很多个小片段,
2:
这个问题是纯粹的生物信息学问题了,测序出来的结果只是每个小片段的碱基序列,有很多序列都是重复的,在举个例子吧:
假如 有五个片段  (1)ATTCGGCTTAAGGATC
                          (2)AAGGATCGATCCGTAAGGGTCAAGG
                          (3)AATCTCCTTCGGATCTGA
                          (4)TCAAGGTCTACGTAATCGGTA
                           (5)AATCGGTACCGCGCGCGTTAG
我们对这五个片段进行拼接,相互比对分析
  (1)ATTCGGCTTAAGGATC
   (2)                  AAGGATCG...GTCAAGG
    (4)                         TCAAGGT...TAATCGGTA
      (5)                                                          AATCGGTA...TAG
由此拼接得到
ATTCGGCTTAAGGATCGATCCGTAAGGGTCAAGG
TCTACGTAATCGGTACCGCGCGCGTTAG
这条序列就是是由 1.2.4.5拼接而来的EST, 也就是说1.2.4.5其实是由一条mRNA打成的不同片段。
当然这个例子只是来说明其中的原理,如果用来做拼接的话必须提高可信度的。

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7楼2013-03-25 15:13:56
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ysy000000

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+2, 有帮助 2013-03-11 16:37:02
简单点说是 mRNA的一部分  人们在对cDNA PCR扩增的过程中 获得的产物 既然是mRNA的一部分作用当然跟mRNA一样
劳其筋骨,饿其体肤。
2楼2013-03-08 10:58:26
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+1, 有帮助 2013-03-11 16:37:23
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-03-08 15:32:23
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axian

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-11 16:37:34
gyesang: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-13 20:21:12
EST就是某个基因所转录的mRNA的一部分,可以用它来代替这个mRNA 从而使用生物信息学分析如blast来注释这个基因的功能等信息。
举个例子:假如一个2kbp的x基因转录成的mRNA长1.5k,我们在测序的时候先要建立cDNA文库,将cDNA随机打断成小片段,测序后得到小片段的长度为400bp(这个与测序仪相关),这里的这段400bp的小片段就做contig,利用生物信息学软件对contig进行拼接,我们得到了1k左右的片段信息,那么此段序列就可以成为EST序列,我们可以用它来代表x基因来注释功能,或者利用它通过RACE等技术得到全长的1.5KmRNA.
纯属个人理解,如有欠妥之处 欢迎大侠指正~
4楼2013-03-08 20:07:45
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