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GST柱结合能力越来越低
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我一个蛋白在大肠杆菌里表达,有GST标签,用GST介质结合本来效果就不好,加了Triton处理结合能力稍有提高,最近亲和效果越来越差了,好像蛋白有脾气似的 。介质有换新的,装的是常压柱,缓冲液重新配置了也没有改善。请问,还有什么办法能提高GST的亲和能力呢? |
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4楼2013-03-13 18:37:52
gaojuan1985
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5楼2013-03-13 19:55:36













。介质有换新的,装的是常压柱,缓冲液重新配置了也没有改善。
回复此楼
还是要检查一下蛋白的情况和缓冲液的pH,说明书上面是说pH要在6.5到8.0之间。我们之前碰到过pH高于8.5,结果既不好结合,结合上去的也不容易洗下来。