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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » NADH、NADP、NADPH溶液的配制与保存
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ksney

新虫 (小有名气)

[求助] NADH、NADP、NADPH溶液的配制与保存

我在做NAD的特异性，有谁做过这方面的实验吗？是否能告诉我NADH、NADP、NADPH溶液怎么配制与保存的？它们的干粉都要在-20度保存，不知它们的溶液是否稳定啊。非常需要大家的帮助。
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1楼 2013-03-05 08:44:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

abc5710110

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ksney: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢你啦 2013-03-05 14:40:13
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 16:42:10
NADH TRIS buffer pH ~8,能保存一个月以上
NADPH 应该跟NADH 差不多
NADP 性质应该跟NAD+差不多，水溶即可，弱酸性环境能稳定保存一个月以上。
这些辅酶最好不用pbs溶。
溶解后4度保存即可。
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2楼2013-03-05 12:49:25
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hxw2009

银虫 (小有名气)
Colowick,  Kaplan,  and  Ciotti  (4)  observed  that  the  rate  of
hydrolysis  of  the  nicotinamide-ribose  linkage  of  NAD  at  100”
increases  with  increasing  pH  above  pH  6.0.  The  rates  of  hy-
drolysis  obtained  in  various  buffers  at  pH  7.5  were  found  to  de-
pend  on  the  type  of  buffer  used.  Tris  and  acetate  buffers  did
not  increase  the  rate  of  hydrolysis  above  that  observed  with  un-
buffered  NAD  at  this  pH,  whereas  phosphate  and  citrate  buffers
enhanced  it  3-  to  4-fold.  It  was  noted  (1)  that  Tris  could  almost
completely  abolish  this  stimulatory  effect  of  phosphate  and
citrate  buffers.
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ksney
8楼2014-05-15 17:25:45
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archyj

金虫 (小有名气)
请问楼主，最近我在用NADH做体外实验，但是一直没有成功，不知道NADH稳定性怎么样，在称量过程中会不会变质，怕氧吗？要严格在无氧环境中操作吗？配置它的溶液要灭菌吗？
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10楼2014-07-19 14:16:04
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abc5710110

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ksney at 2013-03-05 14:42:31
NAD我是用水配的，没有NADH TRIS buffer pH ~8我可以用水配NADH 和NADPH吗...

那样辅酶NADH,NADPH会非常不稳定。讲解的非常快。
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强化多边交流，实现互利共赢
4楼2013-03-05 17:05:35
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2731202JUN

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ksney at 2013-03-05 14:42:31
NAD我是用水配的，没有NADH TRIS buffer pH ~8我可以用水配NADH 和NADPH吗...

我用的NADH钠盐是，直接用水配的，4摄氏度保存的，效果还好，快半个月了！
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6楼2013-05-09 12:30:48
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普通回帖

ksney

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by abc5710110 at 2013-03-05 12:49:25
NADH TRIS buffer pH ~8,能保存一个月以上
NADPH 应该跟NADH 差不多
NADP 性质应该跟NAD+差不多，水溶即可，弱酸性环境能稳定保存一个月以上。
这些辅酶最好不用pbs溶。
溶解后4度保存即可。

NAD我是用水配的，没有NADH TRIS buffer pH ~8我可以用水配NADH 和NADPH吗
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3楼2013-03-05 14:42:31
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守望梧桐

新虫 (小有名气)
可以用1M的TRIS buffer 保存吗？
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5楼2013-03-31 09:48:19
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齐美凤87

铁虫 (初入文坛)
NADPH用水配制 ，用酶标仪测OD值会不会在下降
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7楼2013-07-30 10:42:28
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ksney

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by hxw2009 at 2014-05-15 17:25:45
Colowick,  Kaplan,  and  Ciotti  (4)  observed  that  the  rate  of
hydrolysis  of  the  nicotinamide-ribose  linkage  of  NAD  at  100”
increases  with  increasing  pH  above  pH  6.0.  The  ra ...

9楼2014-05-24 09:34:10
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