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ksney

新虫 (小有名气)

[求助] NADH、NADP、NADPH溶液的配制与保存

我在做NAD的特异性,有谁做过这方面的实验吗?是否能告诉我NADH、NADP、NADPH溶液怎么配制与保存的?它们的干粉都要在-20度保存,不知它们的溶液是否稳定啊。非常需要大家的帮助。
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hxw2009

银虫 (小有名气)

Colowick,  Kaplan,  and  Ciotti  (4)  observed  that  the  rate  of
hydrolysis  of  the  nicotinamide-ribose  linkage  of  NAD  at  100”
increases  with  increasing  pH  above  pH  6.0.  The  rates  of  hy-
drolysis  obtained  in  various  buffers  at  pH  7.5  were  found  to  de-
pend  on  the  type  of  buffer  used.  Tris  and  acetate  buffers  did
not  increase  the  rate  of  hydrolysis  above  that  observed  with  un-
buffered  NAD  at  this  pH,  whereas  phosphate  and  citrate  buffers
enhanced  it  3-  to  4-fold.  It  was  noted  (1)  that  Tris  could  almost
completely  abolish  this  stimulatory  effect  of  phosphate  and
citrate  buffers.

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8楼2014-05-15 17:25:45
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abc5710110

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ksney: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢你啦 2013-03-05 14:40:13
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-27 16:42:10
NADH TRIS buffer pH ~8,能保存一个月以上
NADPH 应该跟NADH 差不多
NADP 性质应该跟NAD+差不多,水溶即可,弱酸性环境能稳定保存一个月以上。
这些辅酶最好不用pbs溶。
溶解后4度保存即可。
强化多边交流,实现互利共赢
2楼2013-03-05 12:49:25
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ksney

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by abc5710110 at 2013-03-05 12:49:25
NADH TRIS buffer pH ~8,能保存一个月以上
NADPH 应该跟NADH 差不多
NADP 性质应该跟NAD+差不多,水溶即可,弱酸性环境能稳定保存一个月以上。
这些辅酶最好不用pbs溶。
溶解后4度保存即可。

NAD我是用水配的,没有NADH TRIS buffer pH ~8我可以用水配NADH 和NADPH吗
3楼2013-03-05 14:42:31
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abc5710110

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ksney at 2013-03-05 14:42:31
NAD我是用水配的,没有NADH TRIS buffer pH ~8我可以用水配NADH 和NADPH吗...

那样辅酶NADH,NADPH会非常不稳定。讲解的非常快。
强化多边交流,实现互利共赢
4楼2013-03-05 17:05:35
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