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cathereen_li新虫 (初入文坛)
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我要扩3kb的片段,人的GLDC基因,总是扩不出来,求大侠指点呀 已有2人参与
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| 我要扩增3kb的片段,人的GLDC基因的cDNA,总是扩不出来,求大侠指点呀!!试过了各种办法,两步法也试过了,一开始用pfu酶,后来用taq酶,LA taq也用过了,都P不出来,用taqP出来了一个,但是大小不对。我的体系为25微升体系,程序与体系如下:94度,3分钟;94度,45秒,55度,40秒,72度3分半,30个循环;72度8分钟。体系:上下游引物各一微升,模板视浓度而定,一般为2到5微升,buffer为2.5微升,dNTP为1.5微升,酶为1微升,补水到25微升。小女子论坛新手,金币不太足,还请各位大侠多多包涵~~~~ |
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凌波丽
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haitian0625
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