24小时热门版块排行榜    

查看: 3288  |  回复: 21

sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-03-13 16:22:02
胶原蛋白分子量在100-300KDa之间,这个SDS-page一般跑不动,所以每条带。你酶解后要是水解充分成小分子肽,只要分子量小于10KDa,甘氨酸SDS-page跑不了这么小分子量的蛋白,可以尝试一下Tricine-sds-page
11楼2013-03-08 17:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色月光

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-08 17:19:51
胶原蛋白分子量在100-300KDa之间,这个SDS-page一般跑不动,所以每条带。你酶解后要是水解充分成小分子肽,只要分子量小于10KDa,甘氨酸SDS-page跑不了这么小分子量的蛋白,可以尝试一下Tricine-sds-page

问题是,我的marker (10~200kD)跑出来了;那如果真的是跑不动,该用什么方法?
而且,我的酶解也是不完全的,就是还没测过分子量分布。
另外,你说的Tricine-sds-page是什么?主要有什么特点?适用于什么?
12楼2013-03-10 14:42:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
黑色月光: 金币+5 2013-03-11 19:44:34
hsd3521: 应助指数+1 2013-03-13 16:21:33
Tricine-SDS-Page相对于我们常用的Glycine-SDS-Page来说它用Tricine替代了尾随离子Glycine,由于尾随离子性质的差异,使得Tricine-SDS-Page更适合跑小分子量蛋白,特别是分子量小于10KDa的小分子蛋白或多台,而且电泳时间缩短。
样品每条带考虑一下是不是样品浓度过低,我以前跑的时候样品浓度低也是每条大的。
13楼2013-03-10 17:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色月光

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-10 17:10:59
Tricine-SDS-Page相对于我们常用的Glycine-SDS-Page来说它用Tricine替代了尾随离子Glycine,由于尾随离子性质的差异,使得Tricine-SDS-Page更适合跑小分子量蛋白,特别是分子量小于10KDa的小分子蛋白或多台,而且电 ...

谢谢,我去试一下
14楼2013-03-11 19:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色月光

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-10 17:10:59
Tricine-SDS-Page相对于我们常用的Glycine-SDS-Page来说它用Tricine替代了尾随离子Glycine,由于尾随离子性质的差异,使得Tricine-SDS-Page更适合跑小分子量蛋白,特别是分子量小于10KDa的小分子蛋白或多台,而且电 ...

另外一个问题是:我的marker (10~200kD)跑出来了,说明电泳至少是跑得动200kD的样品,我担心的是,胶原蛋白分子形成交联后导致总体分子量太大,可能会超过200kD。如果在那种情况下,该用什么方法?
15楼2013-03-11 19:50:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 黑色月光 at 2013-03-11 19:50:40
另外一个问题是:我的marker (10~200kD)跑出来了,说明电泳至少是跑得动200kD的样品,我担心的是,胶原蛋白分子形成交联后导致总体分子量太大,可能会超过200kD。如果在那种情况下,该用什么方法?...

你把酶解后的溶液浓缩后上样试试看,如果出现条带就是以前浓度太低,如果还没有智能再找原因了
16楼2013-03-11 23:26:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛阿毛

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

酶解后  分子量太小了吧?估计都跑出去了。。。。。用下tricine体系的
17楼2013-04-25 13:38:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Alexalex19

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

有可能真是跑出去了
18楼2013-04-25 13:48:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

82134428

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

分离胶浓度的选择不合适?
19楼2013-10-21 16:46:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

12fding12

金虫 (正式写手)

楼上的老兄  您好  您的问题解决了吗  我也遇到了同样的问题   请问怎么解决一下呢
20楼2014-07-03 14:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 黑色月光 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 东南大学364求调剂 +4 JasonYuiui 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:36 by Linda Hu
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 中科院材料273求调剂 +3 yzydy 2026-03-15 3/150 2026-03-15 21:15 by ms629
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-15 3/150 2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,药学 +3 归零lbm 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:21 by JourneyLucky
[考研] 332分材料工程调剂 +3 莓好时光海苔 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:03 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 一志愿郑大070303,338分,求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
请填处理意见