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黑色月光

铜虫 (小有名气)

[求助] 胶原蛋白的电泳为什么跑不出来?已有2人参与

自己从鱼鳞里提了些胶原蛋白,跑了个电泳(SDS-PAGE,考染),但没有条带。其他的蛋白、marker什么的都能跑出来,为什么就这个跑不出来?是不是蛋白浓度太低了?
我后来用较高浓度的蛋白的酶解液(碱性蛋白酶,不完全酶解),也跑不出来,这是为什么啊???

[ Last edited by 黑色月光 on 2013-3-1 at 18:59 ]
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by 黑色月光 at 2013-03-11 19:50:40
另外一个问题是:我的marker (10~200kD)跑出来了,说明电泳至少是跑得动200kD的样品,我担心的是,胶原蛋白分子形成交联后导致总体分子量太大,可能会超过200kD。如果在那种情况下,该用什么方法?...

你把酶解后的溶液浓缩后上样试试看,如果出现条带就是以前浓度太低,如果还没有智能再找原因了
16楼2013-03-11 23:26:45
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

请问较高蛋白含量是多少?测过蛋白含量没?
太胖了!~
2楼2013-03-03 14:54:11
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鎏金

银虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 应助指数-1, 非有效应助,欢迎继续关注 2013-03-04 17:35:47
上样缓冲液是什么?  加完之后怎么处理的咩?
我是快乐的小傻子,嘻嘻嘻嘻
3楼2013-03-04 08:19:57
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victory123

木虫 (正式写手)

会不会是分子量太大,形成交联卡在上样口了……
4楼2013-03-04 20:00:33
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