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黑色月光

铜虫 (小有名气)

[求助] 胶原蛋白的电泳为什么跑不出来?已有2人参与

自己从鱼鳞里提了些胶原蛋白,跑了个电泳(SDS-PAGE,考染),但没有条带。其他的蛋白、marker什么的都能跑出来,为什么就这个跑不出来?是不是蛋白浓度太低了?
我后来用较高浓度的蛋白的酶解液(碱性蛋白酶,不完全酶解),也跑不出来,这是为什么啊???

[ Last edited by 黑色月光 on 2013-3-1 at 18:59 ]
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黑色月光

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by sunnymen at 2013-03-08 17:19:51
胶原蛋白分子量在100-300KDa之间,这个SDS-page一般跑不动,所以每条带。你酶解后要是水解充分成小分子肽,只要分子量小于10KDa,甘氨酸SDS-page跑不了这么小分子量的蛋白,可以尝试一下Tricine-sds-page

问题是,我的marker (10~200kD)跑出来了;那如果真的是跑不动,该用什么方法?
而且,我的酶解也是不完全的,就是还没测过分子量分布。
另外,你说的Tricine-sds-page是什么?主要有什么特点?适用于什么?
12楼2013-03-10 14:42:47
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

请问较高蛋白含量是多少?测过蛋白含量没?
太胖了!~
2楼2013-03-03 14:54:11
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鎏金

银虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 应助指数-1, 非有效应助,欢迎继续关注 2013-03-04 17:35:47
上样缓冲液是什么?  加完之后怎么处理的咩?
我是快乐的小傻子,嘻嘻嘻嘻
3楼2013-03-04 08:19:57
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victory123

木虫 (正式写手)

会不会是分子量太大,形成交联卡在上样口了……
4楼2013-03-04 20:00:33
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