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enuo123金虫 (小有名气)
淘哈哈
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[求助]
求土壤中分离细菌的具体方法
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| 各位大师，本人不是做微生物方面的，因需要带本科生毕业设计，其中有关微生物的部分甚是烦恼，故在此一求。本人需要从土壤中分离出细菌，进而进行培养，用来后续做细菌抗菌性能的研究，因此在此拜求土壤中分离细菌，并将其进行培养的具体方法，各位大侠有提点的意见建议都是好的，再就是我想问下，抗菌性能研究都是研究哪些方面呢？ |
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foolmonkey
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一、从土壤中分离放线菌 1.制作高氏一号培养基，趁热注入培养皿中，凝成平板，待用。 2.称取土壤10克，放入装有100毫升无菌水的锥形瓶中，并加入10%酚10滴，以抑制细菌生长。振荡10分钟，制成10-1菌悬液。按照连续稀释分离法，进一步制成10-3菌悬液。 3.用移液管吸取0.1毫升10-3菌悬液，注入平板培养基上，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀涂抹在整个培养基上。然后将培养皿倒置于25-30℃生化培养箱中，培养7-10天，培养基上会出现微生物菌落。如果菌落的硬度较大，干燥致密，且与基质紧密结合，不易被针挑起，这就是放线菌菌落。 4.挑取放线菌菌落，接种于斜面培养基上。 二、从土壤中分离霉菌 1.制作豆芽汗葡萄糖培养基，并添加80%乳酸数滴，以抑制细菌生长。将培养皿中，凝成平板，待用。 2.称取10克土壤，按上述分离放线菌的方法制成10-4或10-5的菌悬液。 3.取0.1毫升菌悬液注入培养皿内培养基上，用玻璃刮刀涂抹均匀。然后将培养皿倒置于25-30℃温箱内培养3-4天。培养基上会出现微生物菌落。霉菌菌落常长成绒状、棉絮状或蜘蛛网状，可根据这一特征寻找霉菌菌落。 4.挑取培养皿内的霉菌菌落接种于斜面培养基上。 |
4楼2013-02-27 14:31:18
zhangxingc
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这方面的文章很多，楼主可以检索：土壤+菌种分离 按一个期刊论文的模式带一个本科生的毕业论文，应该是没有问题的。 抑菌：主要测两个内容，一是看对哪些菌有抑制能力，如对致病菌；二是看抑菌能力的大小：可以用牛津法测抑菌环直径，或是测被抑菌的生长浓度 |
2楼2013-02-26 15:52:13
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1.称取5g土样（湿重），加到含10ml无菌土样浸出汁（土样灭菌后用无菌水稀释浸出液体）或提取液的250ml三角烧瓶内； 2.26度，150~200r/min震荡培养25min； 3.以适宜的样本稀释液系列稀释培养液； 4.取3个适宜稀释度的稀释液0.1ml，涂布3组（每组3~4个）琼脂平皿； 5.22~26度下皿底朝上培养4~10D，每D检测一次平皿上菌落的形成情况。 培养湿度需根据原土样湿度进行调整，样本的稀释程度根据浊度来掌握，需注意是大黏土的成分衣使浊度明显增高。 |
3楼2013-02-26 16:28:40
进步一点点
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