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bubble1220银虫 (小有名气)
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大家帮我看看质粒肿木了？
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我的质粒大小为2800bp，pUC18复制位点 第一次提取质粒并单酶切验证结果正确，图是这样的 1 质粒 2 单酶切，结果看起来是正确的，下面那条带认为是没有酶切完全的 质粒保存于-20度，2天后再拿出来酶切，结果图是这样的 3 质粒 没什么变成弥散的了？而且带型也和上次不一样了 4 单酶切 结果和上一次一样，但是这回下面那条带我就不认为是没切开的了，因为质粒上也有一条，到底下面那条带是什么啊？  未命名-2.jpg |
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mascotte
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| 质粒提取之后跑胶有时可以看见三条带，分别是线性化，环状和超螺旋状态的质粒。提取的质粒质量好时，线性化的质粒少，大多以超螺旋的形式存在，此种形态的质粒在胶上目测的分子量要小于质粒的实际分子量。如3000bp大小的质粒，看起来只有2800的样子。对超螺旋的质粒进行单酶切，使之线性化再跑胶就可以看到质粒的实际大小。质粒冻融过后，超螺旋的质粒所占的比例会减少，环状和线性化的程度会增加。结合你所说的情况，第一道应该是超螺旋状态的质粒，第二道上面的条带是单酶切后线性化的质粒，下面是酶切不完全的超螺旋。第三道是冻融后的情况，超螺旋减少，环状和线性化程度增加。第四道是酶切过后，完全线性化（上）的质粒和剩余的酶切不完全的超螺旋（下）质粒。 |
11楼2013-02-28 11:08:28
tianchunying
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3楼2013-02-26 09:32:28
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4楼2013-02-26 09:34:32