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bbhgchina铁虫 (初入文坛)
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[求助]
材料表面细胞活性怎么衡量
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各位兄弟姐妹们， （之前发信问了几个牛人同学，都没有回，无意冒犯，但是这个问题还比较急，现在卡着我，所以又发帖来咨询一下）请教一下关于生物细胞试验的一个问题，(非生物专业，只在网上搜索过MTT相关内容）望不吝赐教。 我的目标是观测一种材料表面形态对细胞的影响。 初步设计的试验方案是在实验组和对照组材料上面分别培养细胞，一定时间后（24h,48h,72h）对比两边细胞的差异。 现在的问题是 由于不是生物专业，不知道用什么方法来 对比两组细胞，甚至不知道培养何种细胞比较好。 我目前的想法是 1. 用电镜直接观看细胞形态变化 /粘附 2. 测量活细胞密度（不知道怎么测） 3. MTT 分析细胞活性 否麻烦大家给点建议 |
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Are u using multipotent cells like hMSCs? if yes, you could try high-content imaging (see the proliferation) and immunofluorescence Staining (see the expression of alkaline phosphatase (ALP), a marker for early osteogenic differentiation) |
4楼2013-01-24 01:55:37
bbhgchina
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2楼2013-01-24 00:45:39
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【答案】应助回帖
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ATP analysis could be used to measured the loss in viability because a decrease in ATP production can be linked to a decrease in cell number. Specifically, ATP could be quantified by measuring the light produced through ATP's reaction with a naturally occurring firefly enzyme-Luciferase using a luminometer. The amount of light produced corresponds proportionally to the amount of live cells present in the sample. |
3楼2013-01-24 01:03:24
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Thank you sir. So the name of this sort of analysis is ' the ATP analysis‘? Are these reactions you mentioned? luciferin + ATP → luciferyl adenylate + PPi luciferyl adenylate + O2 → oxyluciferin + AMP + light But, are these reaction happening in every type of cell like fibroblasts and epithelials, which are likely to be used in my experiments according to articles in this field. |
5楼2013-01-24 02:18:57
