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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 分子生物学的哪些手段可以给出什么样的信息（生物材料方向，分子生物学小白）
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pengkai

木虫 (正式写手)

[求助] 分子生物学的哪些手段可以给出什么样的信息（生物材料方向，分子生物学小白）

本人研究材料与细胞的相互作用。如果将细胞种在材料表面，那么如何操作以及做哪些实验可以得到什么样的分子生物学信息。

小白本人听说过PCR western blot等，但是仅限于了解这些方法可以提供相关基因、相关蛋白质的半定量表达，但是不了解什么意思。还望大家指点，相互学习进步。

欢迎大家提供其他常见的分子生物学方法，以及可以得到的结论。
真心高分求助。举例说明会追加金币奖励。
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心若冰清，天塌不惊~
1楼 2012-09-08 20:29:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cexoihtydx

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+2, 有道理 2012-09-11 07:24:09
看天: 金币+3, 鼓励回答 2012-09-17 18:03:31
首先楼主应该介绍一下你把细胞种在材料上的是出于何种目的，研究的原因是什么，这样细胞生物学方面的虫友就知道在细胞层面会用到或可能用到那些技术和方法了，关键看楼主想要做到什么程度，不然会产生很多误解，比如虫右说的MTT就是做细胞试验很常用，但确达不到楼主要求的方法。就单单凭楼主的意思，我想细胞直接计个数，铺在你的材料上，眼睛一下细胞的粘附和迁移就行了。
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不放弃，日子总有阳光，追求总有希望！
6楼2012-09-09 22:02:55
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普通回帖

无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pengkai: 金币+2, ★有帮助, MTT CCK-8 ALP这一类我个人认为不属于分子生物学的评价手段，也就是细胞水平。我的理解是深入到细胞通路、基因表达。其实材料不重要，就是Ti对细胞增殖或者干细胞分化的影响呗。 2012-09-08 23:12:55
不知道LZ用的是什么材料，实验目的是做什么，但是既然与细胞相互作用的话，肯定对细胞活性产生影响，我好想听说过一个实验MTT，就是测定材料对细胞毒性作用，我觉得应该用得上。其他实验的话就得结合LZ实验材料和目的了，PCR WB只是一些常规实验手段，做过一两次就懂了
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2楼2012-09-08 22:03:37
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
看天: 金币+3, 鼓励交流 常来 2012-09-17 18:02:41
引用回帖:
2楼: Originally posted by 无疆@行者 at 2012-09-08 22:03:37
不知道LZ用的是什么材料，实验目的是做什么，但是既然与细胞相互作用的话，肯定对细胞活性产生影响，我好想听说过一个实验MTT，就是测定材料对细胞毒性作用，我觉得应该用得上。其他实验的话就得结合LZ实验材料和目 ...

哦 ，细胞通路的我没有涉及过，不过我觉得要应用到的像LZ说的PCR 的话，应该是实时定量PCR，检测Ti材料作用于细胞后，相关mRNAl量表达水平是否增高，属于一种定量试验。WB 条带的强弱也能说明相关蛋白表达水平的差异。我懂得也就这些，不对的地方请指正，互相学习，细胞通路加上生物化学双学科，前景真让你羡慕
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3楼2012-09-09 00:32:44
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2012-09-09 06:18:43
pengkai: 金币+10, ★★★很有帮助, 相关mRNAl量表达水平是否增高如何分析？ 2012-09-09 14:18:01
哦 ，细胞通路的我没有涉及过，不过我觉得要应用到的像LZ说的PCR 的话，应该是实时定量PCR，检测Ti材料作用于细胞后，相关mRNAl量表达水平是否增高，属于一种定量试验。WB 条带的强弱也能说明相关蛋白表达水平的差异。我懂得也就这些，不对的地方请指正，互相学习，细胞通路加上生物化学双学科，前景真让你羡慕
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4楼2012-09-09 00:38:08
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pengkai: 金币+5, ★有帮助, 弱弱问一下，实时定量PCR和荧光定量PCR 有什么不同，分析手段和说明的结论不同的地方在哪？ 2012-09-09 14:16:43
根据楼主所述，感觉还应该关注RNAi以及RT-PCR
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5楼2012-09-09 11:28:41
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pengkai

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cexoihtydx at 2012-09-09 22:02:55
首先楼主应该介绍一下你把细胞种在材料上的是出于何种目的，研究的原因是什么，这样细胞生物学方面的虫友就知道在细胞层面会用到或可能用到那些技术和方法了，关键看楼主想要做到什么程度，不然会产生很多误解，比如 ...

其实就是粘附和迁移包括增值行为的评价。只是想上升到分子生物学的手段，比如与粘附相关的蛋白表达增多，增殖通路上的基因表达增强就可以。
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心若冰清，天塌不惊~
7楼2012-09-10 11:21:26
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poppy2012

金虫 (小有名气)
★ ★
看天: 金币+2, 你是做什么方面的 2012-09-17 18:04:06
同样地，有木有虫友高手赐教：一个完整的生物材料评价都需要哪些方面的检测？迷茫无助中....真心急切....
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Tomorrowisanotherday!
8楼2012-09-12 16:46:51
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poppy2012

金虫 (小有名气)
★ ★
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-09-17 13:27:29
引用回帖:
8楼: Originally posted by poppy2012 at 2012-09-12 16:46:51
同样地，有木有虫友高手赐教：一个完整的生物材料评价都需要哪些方面的检测？迷茫无助中....真心急切....

自己顶一下
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Tomorrowisanotherday!
9楼2012-09-17 11:00:18
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看天

木虫 (知名作家)
既然是分子 我准备做转录组芯片分析
看看那些基因表达上调哪些下调

楼主有好的思路可以交流
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
10楼2012-09-17 18:05:39
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