| 查看: 5985 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
紧急求助！细胞免疫荧光染色失败，细胞、试剂、抗体全换了还是做不出来
|
|||
|
细胞是IMCD3细胞，小鼠肾上皮纤毛细胞。之前从一家国内公司订的细胞，染得出骨架，染不出纤毛。这次换了新细胞，是师兄从进口细胞库订的，培养基是GIBCO的1640. 胰酶也是GIBCO的。一抗是小鼠单抗α-tubulin，染细胞骨架和纤毛；二抗是invitrogen的荧光二抗，红色荧光，goat抗mouse. 我是4%PFA固定15min，20%羊血清室温封闭半小时，一抗过夜，二抗过夜。一抗稀释比例做过1:1000,1:800 protocol推荐1：1000就行。二抗按1:1000做。 染出来在显微镜下面什么都看不到，一片红茫茫的，分不清背景跟细胞。期间一抗换了新的，从PBS、PFA到羊血清全部重新配了，做过37℃快染和过夜慢染，一次结果都没有。好想哭。。。。求大神解救！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家好，大家养悬浮细胞能做爬片吗？如果做免疫荧光染色细胞是涂片还是爬片？
已经有5人回复
- 小白求助细胞免疫荧光染色问题？
已经有4人回复
- 求救啊！请高手诊断病因所在，关乎实验生死.（免疫荧光技术）
已经有7人回复
ccharlien
木虫 (正式写手)
- 应助: 82 (初中生)
- 金币: 2630.1
- 红花: 3
- 帖子: 334
- 在线: 180.3小时
- 虫号: 1168776
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
6楼2013-01-24 00:17:09
conanzzz
木虫 (正式写手)
- 应助: 76 (初中生)
- 金币: 4633.5
- 散金: 248
- 红花: 5
- 帖子: 524
- 在线: 383小时
- 虫号: 818114
- 注册: 2009-07-29
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
2楼2013-01-23 18:09:49
3楼2013-01-23 19:10:53
4楼2013-01-23 19:13:54
