| 查看: 5519 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
紧急求助！细胞免疫荧光染色失败，细胞、试剂、抗体全换了还是做不出来
|
|||
|
细胞是IMCD3细胞，小鼠肾上皮纤毛细胞。之前从一家国内公司订的细胞，染得出骨架，染不出纤毛。这次换了新细胞，是师兄从进口细胞库订的，培养基是GIBCO的1640. 胰酶也是GIBCO的。一抗是小鼠单抗α-tubulin，染细胞骨架和纤毛；二抗是invitrogen的荧光二抗，红色荧光，goat抗mouse. 我是4%PFA固定15min，20%羊血清室温封闭半小时，一抗过夜，二抗过夜。一抗稀释比例做过1:1000,1:800 protocol推荐1：1000就行。二抗按1:1000做。 染出来在显微镜下面什么都看不到，一片红茫茫的，分不清背景跟细胞。期间一抗换了新的，从PBS、PFA到羊血清全部重新配了，做过37℃快染和过夜慢染，一次结果都没有。好想哭。。。。求大神解救！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工
已经有5人回复
-
289求调剂
已经有6人回复
-
调剂求院校招收
已经有7人回复
-
070300化学354求调剂
已经有10人回复
-
材料专业申博
已经有5人回复
-
287求调剂
已经有17人回复
-
求调剂：085600材料与化工，考材科基，总分319
已经有13人回复
-
一志愿大连理工大学，机械工程学硕，341
已经有3人回复
-
一志愿南昌大学324求调剂
已经有5人回复
-
266分，求材料相关专业调剂
已经有12人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家好，大家养悬浮细胞能做爬片吗？如果做免疫荧光染色细胞是涂片还是爬片？
已经有5人回复
- 小白求助细胞免疫荧光染色问题？
已经有4人回复
- 求救啊！请高手诊断病因所在，关乎实验生死.（免疫荧光技术）
已经有7人回复
zh10246
铁杆木虫 (文坛精英)
- 应助: 348 (大学生)
- 金币: 13510.5
- 散金: 115
- 红花: 47
- 帖子: 14591
- 在线: 879.7小时
- 虫号: 2786456
- 注册: 2013-11-08
- 专业: 细胞外基质
10楼2013-11-14 20:04:28
conanzzz
木虫 (正式写手)
- 应助: 76 (初中生)
- 金币: 4633.5
- 散金: 248
- 红花: 5
- 帖子: 524
- 在线: 383小时
- 虫号: 818114
- 注册: 2009-07-29
- 专业: 细胞生物学研究中的新方法
2楼2013-01-23 18:09:49
3楼2013-01-23 19:10:53
4楼2013-01-23 19:13:54
