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mjzjily铜虫 (初入文坛)
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DpnI 酶消化不了模板，求解。
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| 我最近用PCR扩增的方法扩增线性化质粒，扩增之后用DpnI消化模板。但是构建后依然有很多的假阳性，说明DpnI酶没有起作用。我的质粒是用DH5α扩增的。之前也试过将质粒线性化后再PCR，但多次试验发现不可行。主要问题就是为什么DpnI酶没有起作用？另外，我现在也计划先将质粒甲基化酶处理再做PCR后，在用DpnI酶消化，不知道哪些甲基化酶比较好？谢谢各位！ |
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因为所用的DpnI酶是新订的，没考虑这个酶失效的问题。感谢你的提醒，我试一下。 7楼2013-01-25 14:13:18
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