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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相菜鸟求助，冲错了色谱柱，这咋整
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ymymym723

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2013-01-23 11:03:12
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方子萱

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
PSA: 金币+1, 很详细，学习了 2013-01-23 16:44:47
ymymym723: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-01-23 18:11:43
中药2000: 回帖置顶 2013-01-25 16:59:55
纯水会使某些类型的柱子塌陷，硅烷键断裂，固定相上游离的羟基就会增加，造成保留时间等的变化。但是现在很多柱子对这种情况都作了相应的处理，比如waters的他就在两者之间加了一个亲水性的基团，这样水就不容易使它断裂了！所以说用水冲柱子还是可以的，如果出现柱塌陷，可以用甲醇连续低流速的冲，至少也要24小时！这要看运气的！利巴韦林就是用水做流动相，不过最好还是不要用纯水冲，毕竟会缩短柱子的寿命。我一般做完有磷酸盐后，用8%的甲醇冲1小时，在用80%甲醇冲洗一小时，最后用纯甲醇冲洗后保存！
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~~~
3楼2013-01-23 11:28:18
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方子萱

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+1, thx 2013-01-23 16:42:27
纯水冲柱子对柱子损害很大的，一般都是采用甲醇水进行冲洗~柱效下降了柱子寿命不长了，楼主节哀
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2楼2013-01-23 11:22:50
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+1, 3u 2013-01-23 16:45:09
ymymym723: 金币+168, ★★★很有帮助, 5555，谢谢 2013-01-23 18:12:01
楼主，你用纯水冲了20小时，估计是没办法了。你试试用100%甲醇低流速（大概0.5ml/min）冲20小时吧，看有没有变好。因你用纯水冲的话，里面的硅胶键合就溶解了，形成断层，有了器质性损害，如果真的恢复不了，请节哀。
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4楼2013-01-23 11:33:02
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装水的水杯

捐助贵宾 (著名写手)

能把事情做成的人才是牛人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+2, 学习了 2013-01-23 16:46:19
中药2000: 回帖置顶 2013-01-25 17:01:05
中药2000: 金币+2, 很详细。 2013-01-25 17:01:14
工程师说的有道理，但是没有那么严重。反相色谱柱里的填料是一个硅颗粒上面键合了很多的含18个碳的长链烃。就像你的拳头，遇到极性小的流动相它就伸开，极性变大就握紧。如果是纯水的话就握的很紧，会导致再次松开的时候，个别填料无法完全展开！

所以，你用水冲一晚上相当于让这些填料握紧拳头一晚上，这时候，再次用极性小的流动相冲的时候，不一定都能松开。所以柱效会差很多，不过，你多用纯甲醇或乙腈相低流速多冲一会应该是没有问题的。

再说了，这种柱子，现在已经相当便宜了，一根全新的也就2000-2500元，不要太担心。

建议你用纯甲醇0.2ml/min冲24小时，之后检测下柱效（进一个标准品，看保留时间和峰形以及柱压有没有很大的变化，弱变化不大，就可以接着用啦）
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一定时时记得自己在做什么
5楼2013-01-23 11:55:59
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