| 查看: 1679 | 回复: 3 | ||
511484462金虫 (小有名气)
学生
|
[求助]
Gel-shift实验求助
|
|
小弟准备做Gel-shift实验，有一些不懂的事情，需要向各位求助下，希望大家多多帮助 1、Gel-shift 中所使用的蛋白需要纯化吗？ 2、Gel-shift中所用蛋白的浓度有什么要求吗？如果蛋白的表达水平较低可以做Gel-shift吗？ 3、在检测的时候可以使用蛋白的抗体来检测吗？ 4、Gel-shift中使用的蛋白能用原核表达的真核蛋白吗？ 谢谢大家的无私帮助！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有120人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有机合成实验求助！
已经有14人回复
- 求助～花粉管荧光实验～
已经有26人回复
- Cy3探针标记引物3‘端怎么设计呢？是为了做EMSA（gel-shift）的
已经有5人回复
- 求助：均匀设计实验的数据分析
已经有7人回复
- 求助 SSR实验技术
已经有14人回复
- gel-shift蛋白结合DNA的问题
已经有23人回复
- 【求助】注射剂的配伍稳定性实验应该如何进行？
已经有7人回复
- 【求助】求助实验方案
已经有3人回复
- 【求助】有误差范围，实验需要做几次？
已经有9人回复
- 【求助/交流】组培实验询问？ 烟草的生根
已经有11人回复
- 【求助/交流】请问有做植物彗星实验的吗？
已经有5人回复
- 【求助】请教MeshCutOff，PAO.EnergyShift和KgridCutoff等具体物理意义和取值依据
已经有6人回复
- 【求助】生物毒性实验
已经有5人回复
- 【求助/交流】MTT实验酶标仪波长选择
已经有3人回复
- 【求助】求助-怎么做重复实验
已经有20人回复
- 【求助】拉伸实验结果怎么分析
已经有7人回复
- 【求助】蛋白和药物结合 静态猝灭 计算结合常数
已经有10人回复
- 【求助】EDAC反应实验操作问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】大家做实验都用哪个公司的琼脂糖啊？
已经有36人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
511484462: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-25 11:35:15
511484462: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-25 11:35:15
|
1、Gel-shift 中所使用的蛋白需要纯化吗？ 不一定。核裂解液就可以。必要时用纯化的核酸结合蛋白。 2、Gel-shift中所用蛋白的浓度有什么要求吗？如果蛋白的表达水平较低可以做Gel-shift吗？ 看你用什么方法标记探针。用32P-标的话，核裂解液的总蛋白有2-10ug 即可。纯化蛋白可以更少。 3、在检测的时候可以使用蛋白的抗体来检测吗？ 当然。用抗体产生super-shift是定性结合蛋白的重要方法。 4、Gel-shift中使用的蛋白能用原核表达的真核蛋白吗？ 可以的。但是这些蛋白缺少翻译后修饰，如果蛋白与核酸之间的结合依赖于某种修饰，这种来源的蛋白就不合适。 |
2楼2013-02-09 11:11:14
neuralcrest
金虫 (正式写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 609.5
- 散金: 928
- 红花: 5
- 帖子: 923
- 在线: 353.6小时
- 虫号: 1668292
- 注册: 2012-03-06
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
3楼2013-02-10 20:51:36
511484462
金虫 (小有名气)
学生
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1013
- 帖子: 119
- 在线: 49.2小时
- 虫号: 1138312
- 注册: 2010-11-03
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
4楼2013-07-25 11:35:05
10