| 查看: 3205 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
C48/80刺激RBL-2H3细胞脱颗粒具体实验方案 已有1人参与
|
||
|
各位大侠，我最近在培养RBL-2H3细胞，以前实验室里从来没人做过这个细胞系，因此遇到了好多问题啊！ 首先是细胞培养问题，我用的是GIBICO的MEM粉末培养基，加了15%的FBS，完全按照上海细胞库上面的培养基配方来的，可是每次传代后都有好些细胞会漂起来，而且有时候是成团的漂起来，不知道这是什么原因啊？我种的也不多啊 其次，是我用C48/80刺激的问题。我的实验方案如下： 细胞培养：取对数生长期细胞，调整浓度为2×105个/ml，以1ml/孔的量（2×105个/孔）接种于24孔板中，置37℃、5% CO2培养箱培养24 h后，各孔加入含不同浓度试药的培养液0.5ml（这里，我用过完全培养基配药，但酚红的影响比较大；用过PBS，加药组根本没反应，参考文献上的用台式液也没有反应，不知道是什么原因）。药物配制溶液（DMSO）为空白对照，总酶孔加入1%TritonX-100溶液裂解细胞，每个浓度3个复孔，设置6个空白对孔(加入相应的DMSO)，设置3个空白孔（无细胞），继续培养。 样本收集：细胞加药培养1h后，冰浴10min终止反应。将培养液全部吸取于1.5ml Ep管中，在4℃下3000转离心10min，吸取上清，200ul分装，储存于-20℃，待进行β-己糖胺酶检测。 我想问一下这个药物到底用什么稀释比较好啊？我看到文献上用改良台式液是可以做出来的啊，不知道为什么我却做不出来，郁闷之极，还请各位高人指教啊！！！小女子在此感激不尽！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有158人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 帮忙翻译一段关于生物医药学方面的英文，谢谢~
已经有3人回复
- RBL-2H3细胞能否进行肝素合成研究？
已经有6人回复
8楼2016-03-19 21:23:40
2楼2013-01-19 12:09:08
3楼2013-01-21 15:37:15
zhen真9
木虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2223.1
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 66
- 在线: 43小时
- 虫号: 2009194
- 注册: 2012-09-18
- 专业: 药理学其他科学问题
4楼2013-03-14 10:45:44
