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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助：为什么我的菌在扩大培养后长得不好！
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加油邹

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助：为什么我的菌在扩大培养后长得不好！

我所用的质粒是PET28a转入到大肠杆菌中，先用5mlLB培养过夜，再扩大到1L的TB培养基中培养。原本在TB中培养时应该是3~4h就能到达OD=1.1以上，再诱导。但是现在菌却不能不长，状况：在菌液上有许多的泡沫，菌种有许多碎屑。但操作和培养基应该没问题。求大师指点！
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1楼 2013-01-18 14:04:41
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
加油邹: 金币+1, ★有帮助 2013-01-21 11:23:23
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-01-21 20:59:08
听你说的现象，感觉问题还是在菌种上，菌种老化了吧，换管菌试试
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聪明才智要为意外做准备~~
2楼2013-01-18 14:13:55
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m_rna

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
加油邹: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-21 11:23:39
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2013-01-21 20:59:22
最可能和最坏的结果：感染噬菌体
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小强
3楼2013-01-18 14:24:09
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加油邹

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by m_rna at 2013-01-18 14:24:09
最可能和最坏的结果：感染噬菌体

但是在小试管内长得特别好
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4楼2013-01-18 14:34:36
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m_rna

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 加油邹 at 2013-01-18 14:34:36
但是在小试管内长得特别好...

我们公司以前也有类似的情况，种子长得很好，一放大就挂。希望你不是吧，那个不好弄。建议你做一下噬菌体检测。
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小强
5楼2013-01-18 15:59:09
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加油邹

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-18 14:13:55
听你说的现象，感觉问题还是在菌种上，菌种老化了吧，换管菌试试

这是我新转的质粒，而且质粒测序也正确。
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6楼2013-01-18 16:18:30
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812435324

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 加油邹 at 2013-01-18 16:18:30
这是我新转的质粒，而且质粒测序也正确。...

看你这种情况，应该是在接菌过程中防菌措施没有做好。我们也出现过类似的情况，建议：找个空闲的时间对所在实验区域的进行一下消毒和紫外灯照射，扩大培养过程中注意培养液的灭菌，适当延长灭菌时间，封口要严实。如果用塑料封口膜的话最好用两层。希望对你有所帮助。
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7楼2013-01-21 10:02:50
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812435324

新虫 (初入文坛)
看你这种情况，应该是在接菌过程中防菌措施没有做好。我们也出现过类似的情况，建议：找个空闲的时间对所在实验区域的进行一下消毒和紫外灯照射，扩大培养过程中注意培养液的灭菌，适当延长灭菌时间，封口要严实。如果用塑料封口膜的话最好用两层。希望对你有所帮助。
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8楼2013-01-21 13:54:56
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linyu042

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
9楼2013-01-24 21:55:53
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