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加油邹

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助:为什么我的菌在扩大培养后长得不好!

我所用的质粒是PET28a转入到大肠杆菌中,先用5mlLB培养过夜,再扩大到1L的TB培养基中培养。原本在TB中培养时应该是3~4h就能到达OD=1.1以上,再诱导。但是现在菌却不能不长,状况:在菌液上有许多的泡沫,菌种有许多碎屑。但操作和培养基应该没问题。求大师指点!
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
加油邹: 金币+1, 有帮助 2013-01-21 11:23:23
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-01-21 20:59:08
听你说的现象,感觉问题还是在菌种上,菌种老化了吧,换管菌试试
聪明才智要为意外做准备~~
2楼2013-01-18 14:13:55
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m_rna

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
加油邹: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-21 11:23:39
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助! 2013-01-21 20:59:22
最可能和最坏的结果:感染噬菌体
小强
3楼2013-01-18 14:24:09
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加油邹

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by m_rna at 2013-01-18 14:24:09
最可能和最坏的结果:感染噬菌体

但是在小试管内长得特别好
4楼2013-01-18 14:34:36
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m_rna

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 加油邹 at 2013-01-18 14:34:36
但是在小试管内长得特别好...

我们公司以前也有类似的情况,种子长得很好,一放大就挂。希望你不是吧,那个不好弄。建议你做一下噬菌体检测。
小强
5楼2013-01-18 15:59:09
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加油邹

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-18 14:13:55
听你说的现象,感觉问题还是在菌种上,菌种老化了吧,换管菌试试

这是我新转的质粒,而且质粒测序也正确。
6楼2013-01-18 16:18:30
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812435324

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 加油邹 at 2013-01-18 16:18:30
这是我新转的质粒,而且质粒测序也正确。...

看你这种情况,应该是在接菌过程中防菌措施没有做好。我们也出现过类似的情况,建议:找个空闲的时间对所在实验区域的进行一下消毒和紫外灯照射,扩大培养过程中注意培养液的灭菌,适当延长灭菌时间,封口要严实。如果用塑料封口膜的话最好用两层。希望对你有所帮助。
7楼2013-01-21 10:02:50
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812435324

新虫 (初入文坛)

看你这种情况,应该是在接菌过程中防菌措施没有做好。我们也出现过类似的情况,建议:找个空闲的时间对所在实验区域的进行一下消毒和紫外灯照射,扩大培养过程中注意培养液的灭菌,适当延长灭菌时间,封口要严实。如果用塑料封口膜的话最好用两层。希望对你有所帮助。
8楼2013-01-21 13:54:56
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linyu042

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

9楼2013-01-24 21:55:53
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