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条带不平整如果不是胶和电泳的问题的话多半和样品处理不好。因为你的marker也是和样品差不多，所以问题可能是胶做的不好或者是电泳的问题。其实SDS-PAGE对温度没什么严格的要求，如果想快点看结果我都是直接200v跑biorad的mini胶，条带一样是sharp的。当然如果可以用恒温跑的话会更好。做胶的各种成分，包括丙烯酰胺、Tris buffer、SDS配好后最好过滤，保证体系很均一。 |
11楼2013-01-19 07:56:15
dshlove
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3楼2013-01-18 09:29:36
4楼2013-01-18 17:00:48
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至于你的这个图片，虽然没有上maker，不知道大小，但条带我觉得普遍都挺弥散，这种效果的我也遇到过（见图片），但是我后来将要跑SDS-PAGE的蛋白质样品都加上样缓冲液煮5分钟，将所有制胶所用的试剂都放在4度冰箱，电泳的时候加冰降温，之后的效果就都达到我的要求了（见图片），你也这样试一下吧。预染的maker我也跑过，我觉得效果不好，不知道什么原因，也就不再用了。不过分子量越小的蛋白质跑得越久条带就越弥散是很正常的（看我的图片），可能不是用聚丙烯酰胺，用个别的什么材料来跑会压缩得挺好，因为我要的蛋白质分子量不很小，所以我没有用过。 差.jpg  2012.1.2 4合MonoQ，主2、2、4天，次2、3天，不同天数合疏离前、中、后、合并变性胶.jpg |
5楼2013-01-19 01:03:51
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