| 查看: 3092 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
ying_cheng金虫 (小有名气)
|
[求助]
液相色谱分析氨基酸的衍生方法 已有3人参与
|
||
|
查过一些文献，有用OPA、DNFB、FITC、FMOC等等衍生的，可是每种方法似乎都有其优劣，比如OPA衍生产物不稳定，要尽快进行检测；DNFB的衍生产物稳定，但是毒性很大；FITC用的人也挺多的，但是干扰因素多，还要有真空蒸发装置；不知道文献调研的对不对，在这里请教各位做过类似实验的前辈们，请你们来评价一下吧，顺便给点建议，如果直接有分析方法那当然最好啦……谢啦…… 实验室只有PDA的检测器，没有荧光的，请教一下各位大侠，用哪种衍生试剂产物更稳定、更适合用紫外检测器？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 猜你喜欢
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有10人回复
-
2025年遐想
已经有4人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
-
求个博导看看
已经有18人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 液相色谱柱后衍生发测氨基酸柱后衍生大家用的什么？
已经有4人回复
- HPLC分离氨基酸问题
已经有14人回复
- 液相色谱的流动相选择
已经有6人回复
- 求助HPLC测定氨基酸具体方法
已经有9人回复
- L-天冬氨酸（L-Asp）柱前衍生用于高效液相色谱检测
已经有11人回复
- 论文摘要中的几句话求翻译为英文摘要，只有3句话（生物化学，分析化学，药物分析）
已经有7人回复
- 样品检测 不知道液相条件怎么选择？？谢谢！！！
已经有5人回复
- 我有几道液相色谱的思考题，请大家帮帮忙~~~~(>_<)~~~~
已经有6人回复
- 【求助】氨基酸制剂 高效液相色谱法 有关物质测定
已经有14人回复
- 请问用气相色谱法分离检测氨基酸用什么柱子？
已经有2人回复
- 【求助】求助：请问自动进样器怎么自动完成OPA-FMOC衍生化方法分析氨基酸？
已经有11人回复
- 【求助】关于液相测氨基酸的问题
已经有11人回复
- 【求助】氨基酸的测定
已经有12人回复
- 【求助】氨基酸分析方法
已经有6人回复
- 【求助】氨基酸分析
已经有12人回复
- 【求助/交流】急！关于氨基酸的定性分析
已经有7人回复
【答案】应助回帖
|
做氨基酸分析有一段时间了，各种各样的方法也试过了，仪器也买过了，谈下个人经验 在选取方法之前，我认为首先应该明确目标氨基酸的种类、数量。 如果仅数种氨基酸，如常见的丝、谷、甘、苏、亮、精、鸟，那都不是事儿，OPA、FMOC都没问题（成本低）。需要注意的是这两种衍生都不是很稳定，最好是配合自动进样器进行进样前的自动衍生。（安捷伦和Waters都有标准的自动进样器在线衍生方法，可以参考；PS.推荐用资生堂的MG2柱子，耐受性强一些） 如果加上一些需要二次衍生的就比较麻烦了，特别是半胱，用在线衍生很难保证精密度。可以使用Waters的Accq-tag。这个方法比较稳定，对数量不多的氨基酸也比较有效。最大的缺点是成本较高，连试剂代柱子，每针成本在20块钱左右。另外，也是我不能忍受的一点，对于18种以上的氨基酸分析分离度不好。Waters回应的解决方案是需要买其UPLC-I Class的仪器，仪器和色谱柱的成本都比较以往翻了一番。 无奈于Waters欺负人的行为，花60万买了一台赛卡姆的氨基酸分析仪，结果也没比i Class的UPLC便宜多少。不过现在可以做25种氨基酸的分析了，重现性也比之前有大幅提高。也算比Waters的要强一些。 氨基酸分析仪其实也是HPLC的专业细分产物，主要是利用可控的自动柱前和柱后两次衍生，配合离子交换色谱柱来分离和检测。现在国内市面上的氨基酸分析仪主要是日本日立、英国百康、和赛卡姆三家，日立的要好一些，价格也很贵。同时，还分蛋白水解系统和生理体液系统。蛋白水解的能同时分17种氨基酸，生理体液的最多能分30~34种。目前用了一年，使用进口试剂每针要十几块，国产试剂有一点小干扰，但成本只有不到一块。 另外一种方法也实验了一下，但是没有做下去。就是用离子色谱仪来做。基本上要戴安的ICS3000或5000才可以，因为需要走梯度。期初分离还不错，重现性也行，但是因为进样浓度高，柱子没进到几百针就不行了。再买柱子要一万多，而且到货时间长达一个半月，就放弃了。 |
11楼2014-05-17 17:11:56