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cai3110274木虫 (职业作家)
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[求助]
Trizol 法 RNA提取失败 请虫友帮忙分析下 什么原因?该怎么办吖
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A260/A280=2.05 A260/A230=2.3 浓度1000ng/μL 电泳跑出来怎么会这样呢 ？ 还有一个情况是 我的Trizol试剂是红色的 加氯仿 离心分 三层取上清的 时候 我的上层怎么还是红色的呢 没有无色 有没有知道的 帮忙指点一下 非常着急！ 感谢！ |
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2楼2013-01-17 10:56:04
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
cai3110274: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-17 17:36:48
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cai3110274: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-17 17:36:48
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胶放反了。下面那些亮的是RNA，5S分开成条带，两条大的没分开。上样量是不是有些大了。点样孔有些亮，说明有蛋白核酸复合体。 trizol加入氯仿抽提离心后应该在下面的有机相里。这一步混合一定要充分，使氯仿充分萃取trizol试剂里的有机成分。你说的上面水相还是红的有可能是氯仿萃取不充分。一般在材料使用较多时水相会有一点颜色，那是材料萝莉的水溶性色素。如果你的材料不是含有大量水溶性红色素而水相颜色很红的话，那是有问题。一个是注意氯仿抽提充分，另一个可能是氯仿加的体积不对。 |
3楼2013-01-17 12:01:26
4楼2013-01-17 13:35:42