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huangrui5036金虫 (小有名气)
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[求助]
里氏木霉在10L发酵罐发酵检测不到酶活
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最近在做发酵罐的实验，但发酵罐上做却检测不到酶活。我做的是里氏木霉产木聚糖酶，是一种丝状真菌。培养基的配方已经在摇瓶上优化好，并且在摇瓶里的酶活已经非常可观。在摇瓶里基本上发酵24h就能检测到酶活，48h后酶活就已经很明显了，最大酶活出现在第5天左右。 但悲剧的是我按照摇瓶的配方放大到30L发酵罐上（装液量10L）到现在已经50多小时了却几乎检测不到酶活，悲催的是这已经是第二罐了，两罐都是这样一直检测不到酶活，但菌体生长却很丰富。 与摇瓶不同的是，在罐上做的时候我加入了消泡剂GPE（添加量5ml/L），不知道是不是消泡剂的影响呢？ 还有一个很重要的东西就是溶氧，在种子液接入罐中后几小时后溶氧迅速下降至0.2%左右，然后一直维持这个数值，到现在已经50多个小时，溶氧似乎有回升迹象（已经到1.0%左右），我的通风量是10L/min，是不是这个通风量小了的缘故。 望各位做发酵的高手支招啊，小弟在线等，感激不尽啊！ |
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lihao1988903
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huangrui5036: 金币+50, ★★★很有帮助, 问题基本上已经解决了 2013-03-14 19:05:46
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huangrui5036: 金币+50, ★★★很有帮助, 问题基本上已经解决了 2013-03-14 19:05:46
| 看来是你控制条件不好，调节通气和转速，让溶氧保持一定水平，不要生长太快或者太慢。还有你的消泡剂量怎么那么多啊，我们一般30L才加5ml，消泡剂对菌体生长是有毒性的。而且你发酵罐肯定比摇瓶培养量大了，可能得多培养会儿才会有酶活。要多试几次，摸一下发酵罐的培养条件。 |
3楼2013-01-17 09:23:46
biolio2009
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2楼2013-01-17 08:26:04
huangrui5036
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4楼2013-01-17 14:59:19
huangrui5036
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5楼2013-01-17 20:32:08
10