24小时热门版块排行榜    

查看: 2666  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

huangrui5036

金虫 (小有名气)

[求助] 里氏木霉在10L发酵罐发酵检测不到酶活

最近在做发酵罐的实验,但发酵罐上做却检测不到酶活。我做的是里氏木霉产木聚糖酶,是一种丝状真菌。培养基的配方已经在摇瓶上优化好,并且在摇瓶里的酶活已经非常可观。在摇瓶里基本上发酵24h就能检测到酶活,48h后酶活就已经很明显了,最大酶活出现在第5天左右。
     但悲剧的是我按照摇瓶的配方放大到30L发酵罐上(装液量10L)到现在已经50多小时了却几乎检测不到酶活,悲催的是这已经是第二罐了,两罐都是这样一直检测不到酶活,但菌体生长却很丰富。
      与摇瓶不同的是,在罐上做的时候我加入了消泡剂GPE(添加量5ml/L),不知道是不是消泡剂的影响呢?
      还有一个很重要的东西就是溶氧,在种子液接入罐中后几小时后溶氧迅速下降至0.2%左右,然后一直维持这个数值,到现在已经50多个小时,溶氧似乎有回升迹象(已经到1.0%左右),我的通风量是10L/min,是不是这个通风量小了的缘故。

     望各位做发酵的高手支招啊,小弟在线等,感激不尽啊!
回复此楼
一起学习,一起进步
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui5036

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lihao1988903 at 2013-01-17 09:23:46
看来是你控制条件不好,调节通气和转速,让溶氧保持一定水平,不要生长太快或者太慢。还有你的消泡剂量怎么那么多啊,我们一般30L才加5ml,消泡剂对菌体生长是有毒性的。而且你发酵罐肯定比摇瓶培养量大了,可能得多 ...

不好意思,我写错了,消泡剂的添加量是0.5mL/L,这个添加量算多吗?到今天为止已经发酵80多小时了,还是没检测到酶活。
    我把通风量从10L/min加到20L/min,溶氧可以维持在45%~50%之间,不知道到明天早上会不会跌零。
一起学习,一起进步
5楼2013-01-17 20:32:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

biolio2009

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-01-17 21:36:32
通气量增大,降低搅拌速度,如果发酵气泡不是非常严重,一致影响发酵那就最好别加消泡剂,或者小量加分批加,看看有没有改善。不应该发生这样的事情啊 。
2楼2013-01-17 08:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助! 2013-01-17 21:36:44
huangrui5036: 金币+50, ★★★很有帮助, 问题基本上已经解决了 2013-03-14 19:05:46
看来是你控制条件不好,调节通气和转速,让溶氧保持一定水平,不要生长太快或者太慢。还有你的消泡剂量怎么那么多啊,我们一般30L才加5ml,消泡剂对菌体生长是有毒性的。而且你发酵罐肯定比摇瓶培养量大了,可能得多培养会儿才会有酶活。要多试几次,摸一下发酵罐的培养条件。
3楼2013-01-17 09:23:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui5036

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lihao1988903 at 2013-01-17 09:23:46
看来是你控制条件不好,调节通气和转速,让溶氧保持一定水平,不要生长太快或者太慢。还有你的消泡剂量怎么那么多啊,我们一般30L才加5ml,消泡剂对菌体生长是有毒性的。而且你发酵罐肯定比摇瓶培养量大了,可能得多 ...

是将通气量和转速同时加大吗?通气量调到25L/min怎么样?转速我不敢调大啊,我怕菌体承受不了那么大的剪切力。您怎么看?
一起学习,一起进步
4楼2013-01-17 14:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见