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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

[求助] 柱层析问题请教

请教柱层析的几个问题:
我想分离文冠果壳中的皂苷类物质,采用的是硅胶柱层析分离提取液粗粉。图中是我跑的几个薄层图,图一是甲醇-氯仿1:9、2:8、3:7、4:6、5:5,图二是甲醇-乙酸乙酯1.5:8.5、3:7、4.5:5.5
请问乙酸乙酯和甲醇能否做洗脱剂?我们有压力可达到2mpa的制备色谱仪器,能否直接用薄层的硅胶装柱进行柱层析;从我跑的图来看,选哪种比例的洗脱剂会好些?

甲醇-氯仿.jpg



甲醇-乙酸乙酯.jpg
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xiaolu8185

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好是拿硫酸显下色看看,有没有其它无荧光吸收的成分。现在看的话直接过氯仿:甲醇9:1就挺好了,如果觉得氯仿接触量大可以先用甲醇-乙酸乙酯1.5:8.5过一遍,粗分划段,把这个主斑点冲下来,再拿这一段过氯仿:甲醇9:1。
19楼2013-01-17 11:20:58
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xiaolu8185

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by ZB镜花水月 at 2013-01-17 15:17:07
嗯,感谢您的回复,我们也决定要先过甲醇-乙酸乙酯,再过氯仿甲醇。但是您为什么觉得氯仿甲醇9:1好呢,它的Rf值是0.2,而8:2和7:3不行吗?他们的Rf值分别是0.38、0.57.
还有甲醇和乙酸乙酯组1.5:8.5的rf 值为0.1 ...

正如20楼的仁兄所言,要提取的物质在薄层上面RF在0.2-0.3左右的展开剂最好,如果是买的高效板RF值就要更小(拿纯的时候刚离开原点的体系都成),否则一上柱子就都冲下来了,达不到分离效果,因为自己装的柱子的柱效要比薄层板差远了。最好不要直接就用铺板子的硅胶,太细,流速慢,吸附也严重,建议粗分可以用100-200目,细分的时候再用细的。用氯仿甲醇的时候柱子透明会很好看。
27楼2013-01-18 11:04:27
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