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h_chen

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
ZB镜花水月: 金币+1, 有帮助 2013-01-17 22:24:18
氯仿甲醇的成点性好,乙酸乙酯甲醇分的不好,
用氯仿甲醇9:1或者8:1试试看
学生到企业人转变中
21楼2013-01-17 15:03:54
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
19楼: Originally posted by xiaolu8185 at 2013-01-17 11:20:58
最好是拿硫酸显下色看看,有没有其它无荧光吸收的成分。现在看的话直接过氯仿:甲醇9:1就挺好了,如果觉得氯仿接触量大可以先用甲醇-乙酸乙酯1.5:8.5过一遍,粗分划段,把这个主斑点冲下来,再拿这一段过氯仿:甲醇 ...

嗯,感谢您的回复,我们也决定要先过甲醇-乙酸乙酯,再过氯仿甲醇。但是您为什么觉得氯仿甲醇9:1好呢,它的Rf值是0.2,而8:2和7:3不行吗?他们的Rf值分别是0.38、0.57.
还有甲醇和乙酸乙酯组1.5:8.5的rf 值为0.13,3:7的rf值是0.33,4.5:5.5的rf值是0.5
22楼2013-01-17 15:17:07
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
20楼: Originally posted by Zoe150 at 2013-01-17 13:15:16
要提取的物质在薄层上面RF在0.2-0.3左右的展开剂最好
有拖尾 加甲酸或者乙酸一两滴 或者加氨水 试试看是否改善
如果效果好 过柱子的时候流动相也要加酸或碱

谢谢您的回复,再请教一下过柱子的流动相加乙酸的话按多少比例加呢?
23楼2013-01-17 15:20:38
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 兔子少爷 at 2013-01-17 10:59:12
薄层版上荧光显示一个点,用了显色剂后呢?如果还是一个点,你的目的是不是纯化的?可以显色后再看看有没有其他点,可以换换显色剂试试,甲醇-氯仿1:9、2:8、3:7、4:6系统比较好,用1:9、2:8系统洗脱。

好滴,感谢您的回复
24楼2013-01-17 15:27:17
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by ldjing at 2013-01-17 10:27:17
你这个应该显示的是物质的荧光吧。。。如果可以的话,你可以试一下三元体系吧。。。比如丙酮:氯仿:石油醚。...

谢谢!
25楼2013-01-17 15:27:52
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Zoe150

金虫 (小有名气)

1%到5% 吧 平常用的也就是这个 原则是产物稳定 过柱效果好就可以了
26楼2013-01-18 10:37:41
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xiaolu8185

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by ZB镜花水月 at 2013-01-17 15:17:07
嗯,感谢您的回复,我们也决定要先过甲醇-乙酸乙酯,再过氯仿甲醇。但是您为什么觉得氯仿甲醇9:1好呢,它的Rf值是0.2,而8:2和7:3不行吗?他们的Rf值分别是0.38、0.57.
还有甲醇和乙酸乙酯组1.5:8.5的rf 值为0.1 ...

正如20楼的仁兄所言,要提取的物质在薄层上面RF在0.2-0.3左右的展开剂最好,如果是买的高效板RF值就要更小(拿纯的时候刚离开原点的体系都成),否则一上柱子就都冲下来了,达不到分离效果,因为自己装的柱子的柱效要比薄层板差远了。最好不要直接就用铺板子的硅胶,太细,流速慢,吸附也严重,建议粗分可以用100-200目,细分的时候再用细的。用氯仿甲醇的时候柱子透明会很好看。
27楼2013-01-18 11:04:27
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
27楼: Originally posted by xiaolu8185 at 2013-01-18 11:04:27
正如20楼的仁兄所言,要提取的物质在薄层上面RF在0.2-0.3左右的展开剂最好,如果是买的高效板RF值就要更小(拿纯的时候刚离开原点的体系都成),否则一上柱子就都冲下来了,达不到分离效果,因为自己装的柱子的柱效 ...

谢谢,受益匪浅啊!今天上柱子的时候,发现流速好慢啊,是不是硅胶装的太结实了?是实了好还是松一点?
28楼2013-01-18 14:31:56
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只是读者

铜虫 (小有名气)

哥哥,你可知道皂苷是不会荧光的!建议用硫酸-乙醇做显色剂吧。。。
另外,建议你的板跑高点吧,看你的照片,感觉只跑了一半多一点。。。
29楼2013-01-19 20:20:28
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