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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 培养基优化之缓冲盐 怎么设计
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with_nothing

金虫 (正式写手)

[求助] 培养基优化之缓冲盐 怎么设计

请教大伙儿，培养基优化的时候缓冲盐怎么优化比较合理。

1，查找文献，直接借鉴文献里的缓冲盐，看哪一个配方最好就用哪个，可以对最好的再进行一下调整，按照自己的理解进行设计，实验，看能不能使结果更好。

2，根据文献，缓冲盐种类有四五种吧，所以直接设计实验，但是比较复杂：单一组分各做一个，两两搭配也要做几个，并且文献里各组分的添加量以及总量也各有不同，所以实验设计就比较复杂，我想的是单一组分统一为Xg/L，两两搭配的话就各X/2 g/L，等实验结果出来哪个好就用哪个，再调整一下添加总量（X）。

我觉得不管怎样，按照一个思路做下来就行，可是做汇报的话就会收到很多质疑，
首先第二种方法中，X量的选取，他们认为，各组分的最适量是不一样的，并且后边1:1的搭配也是，各组分的最适搭配比例也不一定1:1，这样的实验结果就不可信，可能其中不好的一种缓冲盐不用Xg/L，用Yg/L会变成好的。同理，改一下比例，也可能让不好的变成好的。

其次，有这样的质疑，文献中碳氮源跟我们的碳氮源不一样，直接借鉴可能不好，再者，根据自己的理解做设计，没有根据，类似抓瞎，抓到好的就用，抓不到呢？

等。。

有木有更好的方法呢？
我怎么说服这些质疑呢？
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江水
1楼 2013-01-14 12:44:50
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oldflying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为什么不先做单因素，然后正交设计或响应面设计呢？这样得出来的结果应该还是有说服力的吧。
赞一下(1人) 回复此楼
一个人的努力和坚持！
2楼2013-01-14 17:01:01
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with_nothing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by oldflying at 2013-01-14 17:01:01
为什么不先做单因素，然后正交设计或响应面设计呢？这样得出来的结果应该还是有说服力的吧。

第二种方法就算是单因素了吧
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江水
3楼2013-01-14 17:15:19
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
with_nothing: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-15 11:43:08
首先在查找文献的基础上，确定使用的缓冲盐，最常用的就是磷酸盐，再就是HEPS，Trils什么的。
第二种思路不行，最起码有些两种组分的，对应的量不同，缓冲范围就不同，不能单纯的对半分。
最重要的除了pH缓冲范围外，还有考虑离子强度，也就是加入的缓冲体系的绝对量的大小。

先看细菌的最适生长pH范围，然后有选择的在常用的缓冲体系里寻找最省时省力。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
4楼2013-01-15 00:25:43
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with_nothing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-01-15 00:25:43
首先在查找文献的基础上，确定使用的缓冲盐，最常用的就是磷酸盐，再就是HEPS，Trils什么的。
第二种思路不行，最起码有些两种组分的，对应的量不同，缓冲范围就不同，不能单纯的对半分。
最重要的除了pH缓冲范围 ...

谢谢耐心讲解，我的菌是乳酸菌，产酸很厉害，缓冲盐的缓冲范围是有限的，能力也是有限的，我用MRS的缓冲盐，初始pH7，发酵完pH都下降到4了

就是考虑到这么多因素，种类，搭配，比例，总量，。。。。。不知道实验该怎么设计了，而且这只是培养基优化中的一小部分，不能搞得太复杂，要不然时间久拖得太长了
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江水
5楼2013-01-15 11:42:58
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idea2020

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
！no.need.to optimized buffer
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6楼2013-01-15 19:15:57
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