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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】培养基与缓冲液配制的问题
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】培养基与缓冲液配制的问题 已有8人参与

一篇外文文献里描述：
LBSP-Liquid medium:
Trypton 1 %
Yeast extract 0.5 %
NaCl 0.5 %
Saccharose 250 mM
K2HPO4 / KH2PO4 50 mM
-pH = 7,2

培养基配制的时候是将K2HPO4 / KH2PO4的终浓度控制在 50 mM ，然后用酸/碱调节好PH？

还是配制好一瓶50 mM的K2HPO4 ，一瓶50 mM的KH2PO4。配制培养基的时候先加入其他物质，最后将两瓶溶液各加入适量，控制最终PH为7.2 ？
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微生物发酵
1楼 2010-07-15 19:53:39
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统（国产AKTA）销售


★ ★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
看天(金币+1):对的 2010-07-15 20:44:09
感觉是配该浓度就好。至于ph 不能那么准确的。就算配好了。灭菌也会变好的。
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2楼2010-07-15 20:15:57
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liouwzh

木虫 (正式写手)
★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
pH值7.2可能50mM的缓冲液的pH，你可以查一下一般的实验书，磷酸缓冲液pH7.2相应的K2HPO4 / KH2PO4的比例都有的。
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3楼2010-07-16 12:51:56
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kobe8md1

铁虫 (初入文坛)
★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
你说的前者
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4楼2010-07-16 22:44:20
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zijing5322

铁虫 (小有名气)
★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
终浓度50mM 最后再调pH
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5楼2010-07-17 12:07:20
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xulanzzz

金虫 (著名写手)
★ ★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-08-24 11:12:12
hkfgwww(金币+5): 2010-08-24 11:15:43
配制好一瓶50 mM的K2HPO4 ，一瓶50 mM的KH2PO4，先加入其他物质，然后用K2HPO4和KH2PO4调节PH至7.2即可。。。
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DOBEST
6楼2010-08-24 10:27:14
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个pH是根据公式算出来的：PH=PKa+lg([a]/)
就想平时配的PBS一样，把两种盐按比例称重就一混合就可以得到想要的ph值
所以既然给你了ph是7.2
你就可以算出或查出两者的比例和50mM下具体的量，直接加就可以了
ph一般都不用调的，不会相差太大

楼上的方法也可以 ，但是最后你还有一个定容问题，当调好之后不可能就正好吧，还需要加水定容，这样50mM就不太准了

所以在猜测的情况下，你都可以自己试试
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7楼2010-08-24 12:14:51
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xiaobao6313

金虫 (正式写手)
最后都要调节pH的
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8楼2010-08-24 13:14:17
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wallace974

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你说的其实是磷酸缓冲液的配制，50mM是指磷酸根的摩尔浓度，给你一个0.2M配制的例子你就明白了。
具体到7.2的你可以查《生物化学实验技术》后的附录，那上面有具体的比例。
一般配培养基的话可以算出需要多少克磷酸二氢钾和磷酸氢二钾，加部分水溶解，再加入溶解其它药品，测一下pH是否是7.2，不是的话调至7.2，最后定容。

0.2M PB配制方法：

配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的NaH2PO4；称取NaH2PO4·2H2O 31.2g加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的NaH2PO4：称取Na2HPO4·12H2O 71.632g加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
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万物一理，万法自然
9楼2010-08-24 16:01:41
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hkfgwww

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wallace974 at 2010-08-24 16:01:41:
你说的其实是磷酸缓冲液的配制，50mM是指磷酸根的摩尔浓度，给你一个0.2M配制的例子你就明白了。
具体到7.2的你可以查《生物化学实验技术》后的附录，那上面有具体的比例。
一般配培养基的话可以算出需要多少克 ...

非常感谢！
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微生物发酵
10楼2010-08-24 18:35:15
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