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汕头大学海洋科学接受调剂
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】培养基与缓冲液配制的问题 已有8人参与

一篇外文文献里描述:
LBSP-Liquid medium:
Trypton 1 %
Yeast extract 0.5 %
NaCl 0.5 %
Saccharose 250 mM
K2HPO4 / KH2PO4 50 mM
-pH = 7,2

培养基配制的时候是将K2HPO4 / KH2PO4的终浓度控制在 50 mM ,然后用酸/碱调节好PH?

还是配制好一瓶50 mM的K2HPO4 ,一瓶50 mM的KH2PO4。配制培养基的时候先加入其他物质,最后将两瓶溶液各加入适量,控制最终PH为7.2 ?
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微生物发酵
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统(国产)销售


★ ★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
看天(金币+1):对的 2010-07-15 20:44:09
感觉是配该浓度就好。至于ph 不能那么准确的。就算配好了。灭菌也会变好的。
2楼2010-07-15 20:15:57
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liouwzh

木虫 (正式写手)


hkfgwww(金币+1):谢谢参与
pH值7.2可能50mM的缓冲液的pH,你可以查一下一般的实验书,磷酸缓冲液pH7.2相应的K2HPO4 / KH2PO4的比例都有的。
3楼2010-07-16 12:51:56
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kobe8md1

铁虫 (初入文坛)


hkfgwww(金币+1):谢谢参与
你说的前者
4楼2010-07-16 22:44:20
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zijing5322

铁虫 (小有名气)


hkfgwww(金币+1):谢谢参与
终浓度50mM 最后再调pH
5楼2010-07-17 12:07:20
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xulanzzz

金虫 (著名写手)

★ ★
hkfgwww(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~ 2010-08-24 11:12:12
hkfgwww(金币+5): 2010-08-24 11:15:43
配制好一瓶50 mM的K2HPO4 ,一瓶50 mM的KH2PO4,先加入其他物质,然后用K2HPO4和KH2PO4调节PH至7.2即可。。。
DOBEST
6楼2010-08-24 10:27:14
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silicare

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个pH是根据公式算出来的:PH=PKa+lg([a]/)
就想平时配的PBS一样,把两种盐按比例称重就一混合就可以得到想要的ph值
所以既然给你了ph是7.2
你就可以算出或查出两者的比例和50mM下具体的量,直接加就可以了
ph一般都不用调的,不会相差太大

楼上的方法也可以 ,但是最后你还有一个定容问题,当调好之后不可能就正好吧,还需要加水定容,这样50mM就不太准了

所以在猜测的情况下,你都可以自己试试
7楼2010-08-24 12:14:51
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xiaobao6313

金虫 (正式写手)

最后都要调节pH的
8楼2010-08-24 13:14:17
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wallace974

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你说的其实是磷酸缓冲液的配制,50mM是指磷酸根的摩尔浓度,给你一个0.2M配制的例子你就明白了。
具体到7.2的你可以查《生物化学实验技术》后的附录,那上面有具体的比例。
一般配培养基的话可以算出需要多少克磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,加部分水溶解,再加入溶解其它药品,测一下pH是否是7.2,不是的话调至7.2,最后定容。

0.2M PB配制方法:

配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的NaH2PO4;称取NaH2PO4·2H2O 31.2g加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的NaH2PO4:称取Na2HPO4·12H2O 71.632g加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
万物一理,万法自然
9楼2010-08-24 16:01:41
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wallace974 at 2010-08-24 16:01:41:
你说的其实是磷酸缓冲液的配制,50mM是指磷酸根的摩尔浓度,给你一个0.2M配制的例子你就明白了。
具体到7.2的你可以查《生物化学实验技术》后的附录,那上面有具体的比例。
一般配培养基的话可以算出需要多少克 ...

非常感谢!
微生物发酵
10楼2010-08-24 18:35:15
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