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hkfgwww

银虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】培养基与缓冲液配制的问题已有8人参与

一篇外文文献里描述：
LBSP-Liquid medium:
Trypton 1 %
Yeast extract 0.5 %
NaCl 0.5 %
Saccharose 250 mM
K2HPO4 / KH2PO4 50 mM
-pH = 7,2

培养基配制的时候是将K2HPO4 / KH2PO4的终浓度控制在 50 mM ，然后用酸/碱调节好PH？

还是配制好一瓶50 mM的K2HPO4 ，一瓶50 mM的KH2PO4。配制培养基的时候先加入其他物质，最后将两瓶溶液各加入适量，控制最终PH为7.2 ？

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微生物发酵

1楼2010-07-15 19:53:39

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wallace974

木虫 (小有名气)

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

你说的其实是磷酸缓冲液的配制，50mM是指磷酸根的摩尔浓度，给你一个0.2M配制的例子你就明白了。
具体到7.2的你可以查《生物化学实验技术》后的附录，那上面有具体的比例。
一般配培养基的话可以算出需要多少克磷酸二氢钾和磷酸氢二钾，加部分水溶解，再加入溶解其它药品，测一下pH是否是7.2，不是的话调至7.2，最后定容。

0.2M PB配制方法：

配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的NaH2PO4；称取NaH2PO4·2H2O 31.2g加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的NaH2PO4：称取Na2HPO4·12H2O 71.632g加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。