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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助 水样中总DNA 的提取！
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shiying_10

银虫 (小有名气)
可以多过几张膜，然后洗脱的时候，把几管的样品都上到一根柱子上。水样，相对土样好提一些，只是步骤比较繁琐。
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科研人生
11楼2013-01-20 15:59:29
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harben

银虫 (初入文坛)
一般是先用石油醚除去原油，取水相，用中空纤维素膜过滤，或者离心。我用普通的滤膜过滤时堵膜太严重，一般50-100ml水就堵死了。
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12楼2013-01-21 08:37:01
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eagle_edu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by harben at 2013-01-21 08:37:01
一般是先用石油醚除去原油，取水相，用中空纤维素膜过滤，或者离心。我用普通的滤膜过滤时堵膜太严重，一般50-100ml水就堵死了。

滤膜上的菌体怎样取下来？
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13楼2013-01-21 16:58:27
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harben

银虫 (初入文坛)
可以把滤器破坏，把膜剪下来，也可以采用反冲的方法，然后离心。
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14楼2013-01-22 07:48:43
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eagle_edu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by harben at 2013-01-22 07:48:43
可以把滤器破坏，把膜剪下来，也可以采用反冲的方法，然后离心。

非常感谢！
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15楼2013-01-22 21:11:23
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fxgowen

金虫 (小有名气)
剪碎滤膜后直接用试剂盒提取貌似不行，我用的土壤试剂盒提取的河水样品，但是在剪碎滤膜后自己配了一个缓冲液超声震荡，之后离心后用沉淀物提取的，你可以试试先超声
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16楼2013-03-19 10:46:48
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eagle_edu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by fxgowen at 2013-03-19 10:46:48
剪碎滤膜后直接用试剂盒提取貌似不行，我用的土壤试剂盒提取的河水样品，但是在剪碎滤膜后自己配了一个缓冲液超声震荡，之后离心后用沉淀物提取的，你可以试试先超声

这个法子不错，谢谢！
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17楼2013-03-19 13:38:05
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benita-chen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by fxgowen at 2013-03-19 10:46:48
剪碎滤膜后直接用试剂盒提取貌似不行，我用的土壤试剂盒提取的河水样品，但是在剪碎滤膜后自己配了一个缓冲液超声震荡，之后离心后用沉淀物提取的，你可以试试先超声

请问您是怎么配的缓冲液啊？还有超声震荡条件是什么呢？谢啦
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18楼2014-04-24 10:11:29
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Neo2000

木虫 (著名写手)
水样中能有多少菌啊，提完直接跑PCR检测

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19楼2014-04-24 11:53:18
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yuan-quan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by oldflying at 2013-01-07 13:28:38
水样提取DNA相对来说还是比较容易的，在2004年的Science上有一篇是做的海洋宏基因组的，对你应该有用，你可以去查一下：《Environmental Genome Shotgun sequencing of The Sargasso Sea》

楼主，有没有现成的这个文章？方不方便发给我呢？我这资源有限，下不到啊
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加油
20楼2014-09-16 23:29:07
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