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lianglq

新虫 (小有名气)

[交流] 天然药物化学-植化分离已有5人参与

我是做植化的,有一样品在甲醇中不能完全溶解,在正相板上,分离度很差;想用反相中低压柱子试试,但在选择流动相上,有些迷惑,请教各位高手!!!不胜感激!!!
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yangliguo007

木虫 (著名写手)

拌样吧。
物竞天择,适者生存。
2楼2013-01-04 21:53:35
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-05 12:17:28
要是甲醇溶解不好的话,上样之后有可能堵柱子,用梯度的甲醇-水洗脱,最后换纯甲醇要是冲不下来了,你可以用丙酮冲柱子。
或者不使用反相柱,你们如果有MCI柱的话也可以试试,MCI兼有反相及除色素的作用,砍断效果不错。
想想现在,有事可做,即是幸福~
3楼2013-01-05 08:49:42
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accn

新虫 (小有名气)

★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-05 12:17:33
不是很明白,样品到底是极性大还是极性小,
极性很小,甲醇也会不溶解,需要用石油醚、氯仿等溶解,还是适合用正相硅胶分离,
如果极性很大,甲醇不溶解,那么一般水的溶解性会更好,这时适合反相,反相用水溶解样品上样再好不过
还有一些物质,极性通常是中等的,比如胡萝卜苷、一些皂苷类,分离到一定纯度后反而什么溶剂也不溶解了,一般采取混合溶剂,加热,溶解后快速上样,现用现溶等办法
4楼2013-01-05 12:04:45
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xujun0713

金虫 (小有名气)


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是哪类化合物呢?用MCI是种办法可以试一下,另外可以看看凝胶柱能不能分离。
5楼2013-01-05 14:09:10
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lianglq

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by laiyin_111 at 2013-01-05 08:49:42
要是甲醇溶解不好的话,上样之后有可能堵柱子,用梯度的甲醇-水洗脱,最后换纯甲醇要是冲不下来了,你可以用丙酮冲柱子。
或者不使用反相柱,你们如果有MCI柱的话也可以试试,MCI兼有反相及除色素的作用,砍断效果 ...

谢谢指导,我是这么想的:样品有100多毫克,我用少量二氯甲烷溶解样品,上中低压反相柱,甲醇-水(高甲醇比例)洗脱,预计可能会堵柱子,降低流速,慢慢洗脱。最后用纯甲醇洗脱。样品在反相板上成点性及分离度很不错。各位给点建议,觉得这样如何?
6楼2013-01-05 17:44:20
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tianhenlanqi

新虫 (小有名气)


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建议你先用分析液相进一针,如果里面有峰的话再做,不然就直接不做了
7楼2013-01-05 21:10:08
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lianglq

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by tianhenlanqi at 2013-01-05 21:10:08
建议你先用分析液相进一针,如果里面有峰的话再做,不然就直接不做了

样品在正相板上分离度很差,反相板上很好,但是在甲醇里溶解性不好,有絮状沉淀,现在气温较低,样品更难溶解。想上反相,我觉得拌样是个办法,但样品损失多少不清楚。摸索吧。
直接上样很可能就堵住子了,用小极性溶剂(二氯甲烷,丙酮)溶解上样,效果不太好,可能是我用的溶剂太多了吧。各位求指教!
各位,谁有一些好的建议或心得:关于样品上反相柱,但在甲醇里面溶解性。交流分享一下啊。谢谢!!!
8楼2013-01-05 22:04:25
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accn

新虫 (小有名气)


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上反相不能用氯仿、二氯甲烷,会将C18链溶下来,丙酮可以,但不建议大量
9楼2013-01-06 09:46:10
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laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家


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引用回帖:
6楼: Originally posted by lianglq at 2013-01-05 17:44:20
谢谢指导,我是这么想的:样品有100多毫克,我用少量二氯甲烷溶解样品,上中低压反相柱,甲醇-水(高甲醇比例)洗脱,预计可能会堵柱子,降低流速,慢慢洗脱。最后用纯甲醇洗脱。样品在反相板上成点性及分离度很不 ...

可以的,加点二氯要是能溶解的话,这个做法是不错的。你要是有MCI的话建议MCI更好,反相毕竟更贵重些。
想想现在,有事可做,即是幸福~
10楼2013-01-07 11:14:57
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